中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
14期
2515-2519
,共5页
刘伟%刘萌%祝劲松%郝红伟%董宁征%周海斌
劉偉%劉萌%祝勁鬆%郝紅偉%董寧徵%週海斌
류위%류맹%축경송%학홍위%동저정%주해빈
骨髓间充质干细胞%骨髓%分离培养%成骨细胞%成骨分化
骨髓間充質榦細胞%骨髓%分離培養%成骨細胞%成骨分化
골수간충질간세포%골수%분리배양%성골세포%성골분화
背景:国内外对骨髓间充质干细胞的体外成骨诱导分化研究手段、测定指标均不够全面.目的:建立并完善一整套人骨髓间充质干细胞的分离培养及鉴定方法,探讨其体外成骨分化能力.方法:采用密度梯度离心法分离培养人骨髓间充质干细胞,流式细胞仪鉴定细胞表面表型.传至第3代时更换成骨诱导培养基进行成骨分化诱导.结果与结论:人骨髓间充质干细胞生长旺盛,传代后增殖旺盛,第3代骨髓间充质干细胞表面表型CD44、CD73、CD90表达阳性,CD34表达阴性.诱导后的成骨细胞碱性磷酸酶活性增加,Gomori、Von kossa、茜素红染色均阳性.RT-PCR检测诱导后细胞有Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、骨钙素、骨唾液酸蛋白、骨桥蛋白及骨连接蛋白基因的表达,证明了人骨髓间充质干细胞成功向成骨方向分化.表明实验建立了一整套稳定、成熟的骨髓间充质干细胞分离、培养、扩增方案.
揹景:國內外對骨髓間充質榦細胞的體外成骨誘導分化研究手段、測定指標均不夠全麵.目的:建立併完善一整套人骨髓間充質榦細胞的分離培養及鑒定方法,探討其體外成骨分化能力.方法:採用密度梯度離心法分離培養人骨髓間充質榦細胞,流式細胞儀鑒定細胞錶麵錶型.傳至第3代時更換成骨誘導培養基進行成骨分化誘導.結果與結論:人骨髓間充質榦細胞生長旺盛,傳代後增殖旺盛,第3代骨髓間充質榦細胞錶麵錶型CD44、CD73、CD90錶達暘性,CD34錶達陰性.誘導後的成骨細胞堿性燐痠酶活性增加,Gomori、Von kossa、茜素紅染色均暘性.RT-PCR檢測誘導後細胞有Ⅰ型膠原、堿性燐痠酶、骨鈣素、骨唾液痠蛋白、骨橋蛋白及骨連接蛋白基因的錶達,證明瞭人骨髓間充質榦細胞成功嚮成骨方嚮分化.錶明實驗建立瞭一整套穩定、成熟的骨髓間充質榦細胞分離、培養、擴增方案.
배경:국내외대골수간충질간세포적체외성골유도분화연구수단、측정지표균불구전면.목적:건립병완선일정투인골수간충질간세포적분리배양급감정방법,탐토기체외성골분화능력.방법:채용밀도제도리심법분리배양인골수간충질간세포,류식세포의감정세포표면표형.전지제3대시경환성골유도배양기진행성골분화유도.결과여결론:인골수간충질간세포생장왕성,전대후증식왕성,제3대골수간충질간세포표면표형CD44、CD73、CD90표체양성,CD34표체음성.유도후적성골세포감성린산매활성증가,Gomori、Von kossa、천소홍염색균양성.RT-PCR검측유도후세포유Ⅰ형효원、감성린산매、골개소、골타액산단백、골교단백급골련접단백기인적표체,증명료인골수간충질간세포성공향성골방향분화.표명실험건립료일정투은정、성숙적골수간충질간세포분리、배양、확증방안.
