中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
7期
1302-1307
,共6页
江立波%张小磊%徐华梓%吴瑞凯%杨光永%吴畏%胡旭琪%郑旭浩
江立波%張小磊%徐華梓%吳瑞凱%楊光永%吳畏%鬍旭琪%鄭旭浩
강립파%장소뢰%서화재%오서개%양광영%오외%호욱기%정욱호
髓核细胞%自噬%细胞凋亡%饥饿
髓覈細胞%自噬%細胞凋亡%饑餓
수핵세포%자서%세포조망%기아
目的:探讨饥饿条件下椎间盘髓核细胞是否发生自噬及自噬对髓核细胞的作用.方法:原代培养SD大鼠髓核细胞,对细胞表型进行鉴定后,将细胞分为正常对照组、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)加DMEM培养基组、3-MA加EBSS培养基组和EBSS饥饿组,接着用单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)染色、透射电镜和Western blotting观察各组细胞的自噬差异,最后采用CCK-8法测定细胞生长抑制率以及TUNEL法测定细胞凋亡率.结果:成功培养出SD大鼠髓核细胞.与对照组相比,电镜和荧光显微镜下观察到EBSS培养基诱导的髓核细胞出现自噬囊泡,但是3-MA 抑制后细胞自噬泡明显减少;Western blotting检测发现LC3-II/LC3-I和Beclin-1/β-actin在EBSS处理组明显大于3-MA+EBSS处理组和对照组(P<0.05),而3-MA+EBSS处理组的细胞抑制率和凋亡率明显高于EBSS处理组(P<0.05).结论:饥饿可以诱导大鼠椎间盘髓核细胞发生自噬,并且3-MA能抑制自噬发生.自噬对饥饿环境下的髓核细胞可能具有一定的保护作用.
目的:探討饑餓條件下椎間盤髓覈細胞是否髮生自噬及自噬對髓覈細胞的作用.方法:原代培養SD大鼠髓覈細胞,對細胞錶型進行鑒定後,將細胞分為正常對照組、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)加DMEM培養基組、3-MA加EBSS培養基組和EBSS饑餓組,接著用單丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)染色、透射電鏡和Western blotting觀察各組細胞的自噬差異,最後採用CCK-8法測定細胞生長抑製率以及TUNEL法測定細胞凋亡率.結果:成功培養齣SD大鼠髓覈細胞.與對照組相比,電鏡和熒光顯微鏡下觀察到EBSS培養基誘導的髓覈細胞齣現自噬囊泡,但是3-MA 抑製後細胞自噬泡明顯減少;Western blotting檢測髮現LC3-II/LC3-I和Beclin-1/β-actin在EBSS處理組明顯大于3-MA+EBSS處理組和對照組(P<0.05),而3-MA+EBSS處理組的細胞抑製率和凋亡率明顯高于EBSS處理組(P<0.05).結論:饑餓可以誘導大鼠椎間盤髓覈細胞髮生自噬,併且3-MA能抑製自噬髮生.自噬對饑餓環境下的髓覈細胞可能具有一定的保護作用.
목적:탐토기아조건하추간반수핵세포시부발생자서급자서대수핵세포적작용.방법:원대배양SD대서수핵세포,대세포표형진행감정후,장세포분위정상대조조、3-갑기선표령(3-methyladenine,3-MA)가DMEM배양기조、3-MA가EBSS배양기조화EBSS기아조,접착용단단광선무이알(monodansylcadaverine,MDC)염색、투사전경화Western blotting관찰각조세포적자서차이,최후채용CCK-8법측정세포생장억제솔이급TUNEL법측정세포조망솔.결과:성공배양출SD대서수핵세포.여대조조상비,전경화형광현미경하관찰도EBSS배양기유도적수핵세포출현자서낭포,단시3-MA 억제후세포자서포명현감소;Western blotting검측발현LC3-II/LC3-I화Beclin-1/β-actin재EBSS처리조명현대우3-MA+EBSS처리조화대조조(P<0.05),이3-MA+EBSS처리조적세포억제솔화조망솔명현고우EBSS처리조(P<0.05).결론:기아가이유도대서추간반수핵세포발생자서,병차3-MA능억제자서발생.자서대기아배경하적수핵세포가능구유일정적보호작용.
