哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
4期
323-328
,共6页
全红%刘松%张昊天%任彩云%庄敏%凌虹%李妍
全紅%劉鬆%張昊天%任綵雲%莊敏%凌虹%李妍
전홍%류송%장호천%임채운%장민%릉홍%리연
HIV-1%包膜%单基因扩增%Nest-PCR
HIV-1%包膜%單基因擴增%Nest-PCR
HIV-1%포막%단기인확증%Nest-PCR
目的 确定HIV-1包膜(envelope,env)单基因扩增(single genome amplification,SGA)的最优反应体系,获得env单基因扩增产物.方法 采用SGA及Nest-PCR扩增HIV-1 env全长基因,并对Nest-PCR反应体系中各成分量进行优化；在此基础上,适当稀释HIV-1感染者cDNA模板进行Nest-PCR,以获得PCR扩增产物阳性率不超过30％的模板稀释度.结果 SGA Nest-PCR扩增HIV-1 env全长基因,引物浓度为0.3 μmol/L,dNTP浓度为0.25 μmol/L时可获得特异性高的env全长基因；凝胶回收纯化及稀释第一轮PCR产物可有效提高特异性条带的产量.采用优化反应体系成功从一名HIV-1感染者体内扩增出18株env单基因序列.结论 优化了HIV-1 env基因SGA Nest-PCR的反应体系,并从HIV-1感染者获得了病毒包膜基因准种,为后续进行准种分析奠定了基础.
目的 確定HIV-1包膜(envelope,env)單基因擴增(single genome amplification,SGA)的最優反應體繫,穫得env單基因擴增產物.方法 採用SGA及Nest-PCR擴增HIV-1 env全長基因,併對Nest-PCR反應體繫中各成分量進行優化；在此基礎上,適噹稀釋HIV-1感染者cDNA模闆進行Nest-PCR,以穫得PCR擴增產物暘性率不超過30％的模闆稀釋度.結果 SGA Nest-PCR擴增HIV-1 env全長基因,引物濃度為0.3 μmol/L,dNTP濃度為0.25 μmol/L時可穫得特異性高的env全長基因；凝膠迴收純化及稀釋第一輪PCR產物可有效提高特異性條帶的產量.採用優化反應體繫成功從一名HIV-1感染者體內擴增齣18株env單基因序列.結論 優化瞭HIV-1 env基因SGA Nest-PCR的反應體繫,併從HIV-1感染者穫得瞭病毒包膜基因準種,為後續進行準種分析奠定瞭基礎.
목적 학정HIV-1포막(envelope,env)단기인확증(single genome amplification,SGA)적최우반응체계,획득env단기인확증산물.방법 채용SGA급Nest-PCR확증HIV-1 env전장기인,병대Nest-PCR반응체계중각성분량진행우화；재차기출상,괄당희석HIV-1감염자cDNA모판진행Nest-PCR,이획득PCR확증산물양성솔불초과30％적모판희석도.결과 SGA Nest-PCR확증HIV-1 env전장기인,인물농도위0.3 μmol/L,dNTP농도위0.25 μmol/L시가획득특이성고적env전장기인；응효회수순화급희석제일륜PCR산물가유효제고특이성조대적산량.채용우화반응체계성공종일명HIV-1감염자체내확증출18주env단기인서렬.결론 우화료HIV-1 env기인SGA Nest-PCR적반응체계,병종HIV-1감염자획득료병독포막기인준충,위후속진행준충분석전정료기출.
