西北林学院学报
西北林學院學報
서북림학원학보
JOURNAL OF NORTHWEST FORESTRY UNIVERSITY
2012年
3期
55-61
,共7页
刘昭军%张胜%赵忠%张博勇%宗建伟
劉昭軍%張勝%趙忠%張博勇%宗建偉
류소군%장성%조충%장박용%종건위
文冠果%韧皮部%蛋白质提取方法%蛋白质裂解液%双向电泳技术
文冠果%韌皮部%蛋白質提取方法%蛋白質裂解液%雙嚮電泳技術
문관과%인피부%단백질제취방법%단백질렬해액%쌍향전영기술
以文冠果当年生硬枝韧皮部为材料,通过TCA/丙酮法提取总蛋白,研究了不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在胶条选择、蛋白质上样量和等电聚焦时间等方面进行了优化.结果表明,TCA/丙酮提取法适用于提取文冠果韧皮部组织总蛋白,得到的图谱背景低,蛋白质点清晰；样品溶解于含有尿素和硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ中,可显著地提高蛋白质的溶解性,获得的总蛋白溶液浓度远大于裂解液Ⅰ提取的总蛋白溶液浓度.在适宜的时间范围用超声波破碎仪处理蛋白质粉溶液有助于大幅度提高裂解液中蛋白质的浓度.等电聚焦条件宜根据样品特性选择,80000 Vh能够使得文冠果韧皮部蛋白质双向凝胶碱性端的横条纹大大减少.
以文冠果噹年生硬枝韌皮部為材料,通過TCA/丙酮法提取總蛋白,研究瞭不同的蛋白質裂解液組成對雙嚮電泳的影響,併在膠條選擇、蛋白質上樣量和等電聚焦時間等方麵進行瞭優化.結果錶明,TCA/丙酮提取法適用于提取文冠果韌皮部組織總蛋白,得到的圖譜揹景低,蛋白質點清晰；樣品溶解于含有尿素和硫脲的蛋白質裂解液Ⅱ中,可顯著地提高蛋白質的溶解性,穫得的總蛋白溶液濃度遠大于裂解液Ⅰ提取的總蛋白溶液濃度.在適宜的時間範圍用超聲波破碎儀處理蛋白質粉溶液有助于大幅度提高裂解液中蛋白質的濃度.等電聚焦條件宜根據樣品特性選擇,80000 Vh能夠使得文冠果韌皮部蛋白質雙嚮凝膠堿性耑的橫條紋大大減少.
이문관과당년생경지인피부위재료,통과TCA/병동법제취총단백,연구료불동적단백질렬해액조성대쌍향전영적영향,병재효조선택、단백질상양량화등전취초시간등방면진행료우화.결과표명,TCA/병동제취법괄용우제취문관과인피부조직총단백,득도적도보배경저,단백질점청석；양품용해우함유뇨소화류뇨적단백질렬해액Ⅱ중,가현저지제고단백질적용해성,획득적총단백용액농도원대우렬해액Ⅰ제취적총단백용액농도.재괄의적시간범위용초성파파쇄의처리단백질분용액유조우대폭도제고렬해액중단백질적농도.등전취초조건의근거양품특성선택,80000 Vh능구사득문관과인피부단백질쌍향응효감성단적횡조문대대감소.
