眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2010年
5期
432-435
,共4页
角膜缘干细胞%羊膜%体外培养
角膜緣榦細胞%羊膜%體外培養
각막연간세포%양막%체외배양
目的 探讨人自体角膜缘干细胞(LSCs)体外培养及鉴定的方法.方法 将供体新鲜人角膜缘组织在制备的含20%胎牛血清DMEM/F12培养基的羊膜载体上应用组织块培养法进行体外培养,对培养获得的LSCs用苏木精-伊红染色在倒置显微镜下进行形态学观察,用免疫荧光技术鉴定培养的LSCs细胞.结果 组织块静置2h后贴壁良好,3～4d细胞从组织块边缘萌出,7～10d细胞出现生长高峰,12～14d形成良好的细胞单层.细胞形态呈多边形、圆形、卵圆形和梭形.第14天时行间接免疫荧光染色,可见大量细胞表达p63,呈细胞质的绿色荧光;少量细胞表达AE5,呈细胞质的绿色荧光和细胞核的红色荧光.结论 组织块培养法体外培养的人LSCs具有与正常人LSCs相一致的生物学特性.
目的 探討人自體角膜緣榦細胞(LSCs)體外培養及鑒定的方法.方法 將供體新鮮人角膜緣組織在製備的含20%胎牛血清DMEM/F12培養基的羊膜載體上應用組織塊培養法進行體外培養,對培養穫得的LSCs用囌木精-伊紅染色在倒置顯微鏡下進行形態學觀察,用免疫熒光技術鑒定培養的LSCs細胞.結果 組織塊靜置2h後貼壁良好,3～4d細胞從組織塊邊緣萌齣,7～10d細胞齣現生長高峰,12～14d形成良好的細胞單層.細胞形態呈多邊形、圓形、卵圓形和梭形.第14天時行間接免疫熒光染色,可見大量細胞錶達p63,呈細胞質的綠色熒光;少量細胞錶達AE5,呈細胞質的綠色熒光和細胞覈的紅色熒光.結論 組織塊培養法體外培養的人LSCs具有與正常人LSCs相一緻的生物學特性.
목적 탐토인자체각막연간세포(LSCs)체외배양급감정적방법.방법 장공체신선인각막연조직재제비적함20%태우혈청DMEM/F12배양기적양막재체상응용조직괴배양법진행체외배양,대배양획득적LSCs용소목정-이홍염색재도치현미경하진행형태학관찰,용면역형광기술감정배양적LSCs세포.결과 조직괴정치2h후첩벽량호,3～4d세포종조직괴변연맹출,7～10d세포출현생장고봉,12～14d형성량호적세포단층.세포형태정다변형、원형、란원형화사형.제14천시행간접면역형광염색,가견대량세포표체p63,정세포질적록색형광;소량세포표체AE5,정세포질적록색형광화세포핵적홍색형광.결론 조직괴배양법체외배양적인LSCs구유여정상인LSCs상일치적생물학특성.
