中国农业科学
中國農業科學
중국농업과학
SCIENTIA AGRICULTURA SINICA
2002年
8期
995-1001
,共7页
于涟%李建荣%黄耀伟%孟松树%宋厚辉
于漣%李建榮%黃耀偉%孟鬆樹%宋厚輝
우련%리건영%황요위%맹송수%송후휘
传染性法氏囊病病毒%A节段全长cDNA%多聚蛋白%VP2%DNA疫苗
傳染性法氏囊病病毒%A節段全長cDNA%多聚蛋白%VP2%DNA疫苗
전염성법씨낭병병독%A절단전장cDNA%다취단백%VP2%DNA역묘
将传染性法氏囊病病毒弱毒株(IBDV-JD1)和强毒株(IBDV-ZJ2000)的基因组A节段全长cDNA、多聚蛋白(VP2/VP4/VP3)和主要宿主保护性抗原(VP2)基因,分别克隆入两种真核表达载体pCI和pcDNA3,构建成12种真核表达质粒.将制备的DNA疫苗以200μg的剂量经腿肌和皮下结合途径首免14日龄SPF鸡,28日龄以相同的剂量二免,二免后14d攻击IBDV标准强毒BC6/85株.结果表明,含A节段或多聚蛋白基因的表达载体均能诱导较高水平的中和抗体并能提供对强毒的免疫保护,多聚蛋白基因构建成的DNA疫苗与弱毒苗B87的免疫效果相当;编码VP2基因的DNA疫苗仅能诱导很低水平的中和抗体,几乎不能提供免疫保护;以pCI为表达载体的免疫效果优于pcDNA3;源于ZJ2000株基因构建成的DNA疫苗诱导的免疫反应优于JD1株,提示DNA疫苗的免疫效果与VP2蛋白的构象、表达载体的调控元件和毒株差异等因素有关.
將傳染性法氏囊病病毒弱毒株(IBDV-JD1)和彊毒株(IBDV-ZJ2000)的基因組A節段全長cDNA、多聚蛋白(VP2/VP4/VP3)和主要宿主保護性抗原(VP2)基因,分彆剋隆入兩種真覈錶達載體pCI和pcDNA3,構建成12種真覈錶達質粒.將製備的DNA疫苗以200μg的劑量經腿肌和皮下結閤途徑首免14日齡SPF鷄,28日齡以相同的劑量二免,二免後14d攻擊IBDV標準彊毒BC6/85株.結果錶明,含A節段或多聚蛋白基因的錶達載體均能誘導較高水平的中和抗體併能提供對彊毒的免疫保護,多聚蛋白基因構建成的DNA疫苗與弱毒苗B87的免疫效果相噹;編碼VP2基因的DNA疫苗僅能誘導很低水平的中和抗體,幾乎不能提供免疫保護;以pCI為錶達載體的免疫效果優于pcDNA3;源于ZJ2000株基因構建成的DNA疫苗誘導的免疫反應優于JD1株,提示DNA疫苗的免疫效果與VP2蛋白的構象、錶達載體的調控元件和毒株差異等因素有關.
장전염성법씨낭병병독약독주(IBDV-JD1)화강독주(IBDV-ZJ2000)적기인조A절단전장cDNA、다취단백(VP2/VP4/VP3)화주요숙주보호성항원(VP2)기인,분별극륭입량충진핵표체재체pCI화pcDNA3,구건성12충진핵표체질립.장제비적DNA역묘이200μg적제량경퇴기화피하결합도경수면14일령SPF계,28일령이상동적제량이면,이면후14d공격IBDV표준강독BC6/85주.결과표명,함A절단혹다취단백기인적표체재체균능유도교고수평적중화항체병능제공대강독적면역보호,다취단백기인구건성적DNA역묘여약독묘B87적면역효과상당;편마VP2기인적DNA역묘부능유도흔저수평적중화항체,궤호불능제공면역보호;이pCI위표체재체적면역효과우우pcDNA3;원우ZJ2000주기인구건성적DNA역묘유도적면역반응우우JD1주,제시DNA역묘적면역효과여VP2단백적구상、표체재체적조공원건화독주차이등인소유관.
