首都师范大学学报(自然科学版)
首都師範大學學報(自然科學版)
수도사범대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF CAPITAL NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2004年
3期
46-51
,共6页
柴小清%靳飞%张艳萍%卫功宏%印莉萍
柴小清%靳飛%張豔萍%衛功宏%印莉萍
시소청%근비%장염평%위공굉%인리평
水稻,缺铁胁迫,双向电泳(2-DE)
水稻,缺鐵脅迫,雙嚮電泳(2-DE)
수도,결철협박,쌍향전영(2-DE)
水稻幼苗经缺铁胁迫诱导处理1、3、5 d后,用酚法和TCA/丙酮法提取叶的可溶性蛋白,进行双向电泳(2-DE)分析.结果显示:(1)三种缺铁胁迫的可溶性蛋白,在不同的pH范围中2-DE图谱上的比较.使用pH3~10宽范围、线性(L)的IPG胶条,经电泳分离后利用Z3图象分析软件,可在SDS-PAGE凝胶上检测到450个左右的蛋白点,酸性蛋白占89%.选用pH4~7窄范围、线性(L)的IPG胶条,经电泳后可在SDS-PAGE凝胶上检测到600个左右的蛋白点,其中缺铁诱导上调表达的有29个点,减弱表达的有1个点,诱导特异表达的有5个点.(2)不同方法提取可溶性蛋白的差异.酚法提取的蛋白再溶性好,纯度较高.TCA/丙酮法简单易操作,蛋白损耗少,在2-DE图象上,碱性端显示的蛋白点较多,但此法的缺点是再溶性差,对2-DE成功分离蛋白有影响.
水稻幼苗經缺鐵脅迫誘導處理1、3、5 d後,用酚法和TCA/丙酮法提取葉的可溶性蛋白,進行雙嚮電泳(2-DE)分析.結果顯示:(1)三種缺鐵脅迫的可溶性蛋白,在不同的pH範圍中2-DE圖譜上的比較.使用pH3~10寬範圍、線性(L)的IPG膠條,經電泳分離後利用Z3圖象分析軟件,可在SDS-PAGE凝膠上檢測到450箇左右的蛋白點,痠性蛋白佔89%.選用pH4~7窄範圍、線性(L)的IPG膠條,經電泳後可在SDS-PAGE凝膠上檢測到600箇左右的蛋白點,其中缺鐵誘導上調錶達的有29箇點,減弱錶達的有1箇點,誘導特異錶達的有5箇點.(2)不同方法提取可溶性蛋白的差異.酚法提取的蛋白再溶性好,純度較高.TCA/丙酮法簡單易操作,蛋白損耗少,在2-DE圖象上,堿性耑顯示的蛋白點較多,但此法的缺點是再溶性差,對2-DE成功分離蛋白有影響.
수도유묘경결철협박유도처리1、3、5 d후,용분법화TCA/병동법제취협적가용성단백,진행쌍향전영(2-DE)분석.결과현시:(1)삼충결철협박적가용성단백,재불동적pH범위중2-DE도보상적비교.사용pH3~10관범위、선성(L)적IPG효조,경전영분리후이용Z3도상분석연건,가재SDS-PAGE응효상검측도450개좌우적단백점,산성단백점89%.선용pH4~7착범위、선성(L)적IPG효조,경전영후가재SDS-PAGE응효상검측도600개좌우적단백점,기중결철유도상조표체적유29개점,감약표체적유1개점,유도특이표체적유5개점.(2)불동방법제취가용성단백적차이.분법제취적단백재용성호,순도교고.TCA/병동법간단역조작,단백손모소,재2-DE도상상,감성단현시적단백점교다,단차법적결점시재용성차,대2-DE성공분리단백유영향.