CAJ | 학술논문

目的:探讨淫羊藿苷(icariin, ICA)对肝癌细胞H22荷瘤小鼠体内抑瘤作用及其机制.方法:肝癌细胞株H22右腋皮下接种C57BL/6小鼠,建立小鼠体内荷移植瘤模型.接种H22细胞后24 h,用高、中、低不同剂量(9、4.5、2.25 mg/ml)的ICA和环磷酰胺(cyclophosphamide, Cy)(30 mg/kg)进行局部注射治疗,待荷瘤对照组肿瘤长至1 g左右,各组小鼠称重,处死.留自凝血,取血清检测TNF-α;依次取脾脏及肿瘤组织称重;取1/2脾脏和肿瘤组织制成单细胞悬液,剩余的用10%中性甲醛溶液固定,做病理切片和H-E染色以及TUNEL实验;脾单细胞悬液用流式细胞术(FACS)检测CD3、CD4、CD8、DX5等抗原分子的表达;肿瘤单细胞悬液用AnnexinV/PI双染检测肿瘤细胞的早期与晚期凋亡情况,同时取适量的瘤细胞用70%乙醇固定以FACS检测肿瘤细胞周期各时相的分布情况.结果:Cy治疗组抑瘤率为67.16%,ICA高、中、低剂量治疗组抑瘤率分别为24.63%、 32.84%、5.22%. AnnexinV/PI双染结果表明,Cy治疗组与ICA治疗组早期凋亡细胞率均高于荷瘤对照组[Cy组为(9.11±1.584)%,ICA组为(7.14±1.376)%,荷瘤对照组为(3.6±2.38)%].TUNEL结果显示,ICA治疗组凋亡指数为(5.35±0.73)%,显著高于荷瘤对照组中的凋亡指数[(1.03±1.17)%](P＜0.01).正常小鼠血清中未检测到TNF-α的存在,而ICA治疗组及Cy治疗组中检测到微量TNF-α.病理检测表明,ICA中、高剂量组肿瘤组织中出现较多的灶状及小片状坏死,包膜处及肿瘤边缘可见瘤细胞坏死,包膜及肿瘤组织中可见少量的炎细胞(淋巴细胞与单核细胞)浸润.结论: ICA有显著的抑瘤作用,可能通过促进实体瘤细胞早期凋亡引起肿瘤组织坏死而起作用.
목적:탐토음양곽감(icariin, ICA)대간암세포H22하류소서체내억류작용급기궤제.방법:간암세포주H22우액피하접충C57BL/6소서,건립소서체내하이식류모형.접충H22세포후24 h,용고、중、저불동제량(9、4.5、2.25 mg/ml)적ICA화배린선알(cyclophosphamide, Cy)(30 mg/kg)진행국부주사치료,대하류대조조종류장지1 g좌우,각조소서칭중,처사.류자응혈,취혈청검측TNF-α;의차취비장급종류조직칭중;취1/2비장화종류조직제성단세포현액,잉여적용10%중성갑철용액고정,주병리절편화H-E염색이급TUNEL실험;비단세포현액용류식세포술(FACS)검측CD3、CD4、CD8、DX5등항원분자적표체;종류단세포현액용AnnexinV/PI쌍염검측종류세포적조기여만기조망정황,동시취괄량적류세포용70%을순고정이FACS검측종류세포주기각시상적분포정황.결과:Cy치료조억류솔위67.16%,ICA고、중、저제량치료조억류솔분별위24.63%、 32.84%、5.22%. AnnexinV/PI쌍염결과표명,Cy치료조여ICA치료조조기조망세포솔균고우하류대조조[Cy조위(9.11±1.584)%,ICA조위(7.14±1.376)%,하류대조조위(3.6±2.38)%].TUNEL결과현시,ICA치료조조망지수위(5.35±0.73)%,현저고우하류대조조중적조망지수[(1.03±1.17)%](P＜0.01).정상소서혈청중미검측도TNF-α적존재,이ICA치료조급Cy치료조중검측도미량TNF-α.병리검측표명,ICA중、고제량조종류조직중출현교다적조상급소편상배사,포막처급종류변연가견류세포배사,포막급종류조직중가견소량적염세포(림파세포여단핵세포)침윤.결론: ICA유현저적억류작용,가능통과촉진실체류세포조기조망인기종류조직배사이기작용.