标记免疫分析与临床
標記免疫分析與臨床
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LABELED IMMUNOASSAYS AND CLINICAL MEDICINE
2008年
3期
156-158
,共3页
杨永昌%王北宁%赖春宁%黎燕
楊永昌%王北寧%賴春寧%黎燕
양영창%왕북저%뢰춘저%려연
血小板%单克隆抗体%蛋白纯化%生物活性
血小闆%單剋隆抗體%蛋白純化%生物活性
혈소판%단극륭항체%단백순화%생물활성
原核表达重组质粒p3MH/P140?Fd,在E.coli XLI-Blue菌中获得了成功表达,利用重组蛋白中的6个组氨酸(His)组成的"标签"进行亲和层析,对表达产物进行纯化.SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot的检测结果证明,纯化得到的分子量约47kD蛋白是鼠源性的Fab抗体,ELISA检测结果证明,P140Fab抗体与人血小板能特异性结合.体外二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集抑制试验证明,P140Fab抗体对血小板的聚集有抑制作用,并且具有剂量抑制效应,IC50的平均值为16.85mg/L.
原覈錶達重組質粒p3MH/P140?Fd,在E.coli XLI-Blue菌中穫得瞭成功錶達,利用重組蛋白中的6箇組氨痠(His)組成的"標籤"進行親和層析,對錶達產物進行純化.SDS-PAGE蛋白電泳和Western blot的檢測結果證明,純化得到的分子量約47kD蛋白是鼠源性的Fab抗體,ELISA檢測結果證明,P140Fab抗體與人血小闆能特異性結閤.體外二燐痠腺苷(ADP)誘導的血小闆聚集抑製試驗證明,P140Fab抗體對血小闆的聚集有抑製作用,併且具有劑量抑製效應,IC50的平均值為16.85mg/L.
원핵표체중조질립p3MH/P140?Fd,재E.coli XLI-Blue균중획득료성공표체,이용중조단백중적6개조안산(His)조성적"표첨"진행친화층석,대표체산물진행순화.SDS-PAGE단백전영화Western blot적검측결과증명,순화득도적분자량약47kD단백시서원성적Fab항체,ELISA검측결과증명,P140Fab항체여인혈소판능특이성결합.체외이린산선감(ADP)유도적혈소판취집억제시험증명,P140Fab항체대혈소판적취집유억제작용,병차구유제량억제효응,IC50적평균치위16.85mg/L.
