湖南环境生物职业技术学院学报
湖南環境生物職業技術學院學報
호남배경생물직업기술학원학보
JOURNAL OF HUNAN ENVIRONMENT-BIOLOGICAL POLYTECHNIC
2008年
4期
48-51
,共4页
周洲%游晓星%胡旃%陈洪亮
週洲%遊曉星%鬍旃%陳洪亮
주주%유효성%호전%진홍량
肺炎嗜衣原体%主要外膜蛋白(MOMP)%基因表达
肺炎嗜衣原體%主要外膜蛋白(MOMP)%基因錶達
폐염기의원체%주요외막단백(MOMP)%기인표체
表达肺炎嗜衣原体(chlamydia pneumoniae,Cpn)主要外膜蛋白(MOMP)的可变区VD2-VD3区,纯化产物并进行免疫活性分析,为探索重组蛋白在肺炎嗜衣原体血清学诊断中的应用提供资料.应用聚合酶联反应(PCR)技术,从肺炎嗜衣原体标准株AR-39的MOMP上扩增出抗原优势表位VD2-VD3区,将目的片段定向插入pET-30a载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并以Ni-NTA亲和层析柱纯化表达产物并行westem-blot鉴定.成功构建了pET-30a-MOMPVD2-VD3的原核表达系统,表达并纯化出相对分子质量(Mr)为24×103Da的重组蛋白.Western-blot证实重组蛋白能与Cpn MOMP多克隆抗体发生特异性反应.肺炎嗜衣原体的MOMPVD2-VD3基因可以在大肠杆菌中得到表达,其表达产物能与相应的抗体结合,为肺炎嗜衣原体诊断候选抗原的研究奠定了基础.图4,参9.
錶達肺炎嗜衣原體(chlamydia pneumoniae,Cpn)主要外膜蛋白(MOMP)的可變區VD2-VD3區,純化產物併進行免疫活性分析,為探索重組蛋白在肺炎嗜衣原體血清學診斷中的應用提供資料.應用聚閤酶聯反應(PCR)技術,從肺炎嗜衣原體標準株AR-39的MOMP上擴增齣抗原優勢錶位VD2-VD3區,將目的片段定嚮插入pET-30a載體,轉化大腸桿菌BL21,IPTG誘導錶達併以Ni-NTA親和層析柱純化錶達產物併行westem-blot鑒定.成功構建瞭pET-30a-MOMPVD2-VD3的原覈錶達繫統,錶達併純化齣相對分子質量(Mr)為24×103Da的重組蛋白.Western-blot證實重組蛋白能與Cpn MOMP多剋隆抗體髮生特異性反應.肺炎嗜衣原體的MOMPVD2-VD3基因可以在大腸桿菌中得到錶達,其錶達產物能與相應的抗體結閤,為肺炎嗜衣原體診斷候選抗原的研究奠定瞭基礎.圖4,參9.
표체폐염기의원체(chlamydia pneumoniae,Cpn)주요외막단백(MOMP)적가변구VD2-VD3구,순화산물병진행면역활성분석,위탐색중조단백재폐염기의원체혈청학진단중적응용제공자료.응용취합매련반응(PCR)기술,종폐염기의원체표준주AR-39적MOMP상확증출항원우세표위VD2-VD3구,장목적편단정향삽입pET-30a재체,전화대장간균BL21,IPTG유도표체병이Ni-NTA친화층석주순화표체산물병행westem-blot감정.성공구건료pET-30a-MOMPVD2-VD3적원핵표체계통,표체병순화출상대분자질량(Mr)위24×103Da적중조단백.Western-blot증실중조단백능여Cpn MOMP다극륭항체발생특이성반응.폐염기의원체적MOMPVD2-VD3기인가이재대장간균중득도표체,기표체산물능여상응적항체결합,위폐염기의원체진단후선항원적연구전정료기출.도4,삼9.
