CAJ | 학술논문

参照GenBank发表的猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位的编码区基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增后,将约为600bp的目的片段克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-gB经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达.SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量约为42.4KDa,主要以包涵体形式存在.BandScan分析表明,表达量约占菌体蛋白的60.5%.利用His亲和层析方法得到了纯化的表达产物.Western blotting结果显示,重组蛋白能与阳性血清发生特异性反应,具有较好的抗原反应原性,可以作为检测用抗原.
삼조GenBank발표적저위광견병독낭막당단백gB주요항원표위적편마구기인서렬,설계일대인물,통과PCR확증후,장약위600bp적목적편단극륭도pGEM-T재체상,매절후삽입원핵표체재체pET-32(a)적T7계동자하유,구건적중조질립pET-gB경IPTG유도,재대장간균BL21(DE3)중획득료고효표체.SDS-PAGE결과현시,표체산물분자량약위42.4KDa,주요이포함체형식존재.BandScan분석표명,표체량약점균체단백적60.5%.이용His친화층석방법득도료순화적표체산물.Western blotting결과현시,중조단백능여양성혈청발생특이성반응,구유교호적항원반응원성,가이작위검측용항원.