分析测试学报
分析測試學報
분석측시학보
JOURNAL OF INSTRUMENTAL ANALYSIS
2010年
9期
900-905
,共6页
张冬梅%刘红霞%毕开顺%陈晓辉%赵玉芬%蒋宇扬
張鼕梅%劉紅霞%畢開順%陳曉輝%趙玉芬%蔣宇颺
장동매%류홍하%필개순%진효휘%조옥분%장우양
二丙基亚磷酰酯%磷酰化修饰%从头测序%蛋白质组学%电喷雾质谱
二丙基亞燐酰酯%燐酰化脩飾%從頭測序%蛋白質組學%電噴霧質譜
이병기아린선지%린선화수식%종두측서%단백질조학%전분무질보
该文建立了一种利用磷酰化修饰结合电喷雾质谱(ESI-Q-TOF)测定多肽氨基酸序列的有效方法.利用Atherton-Todd反应,以二丙基亚磷酰酯(DPP)为磷酰化试剂,应用生物质谱技术,对磷酰化修饰后的5种模型肽的磷酰化反应情况进行了系统研究,考察了磷酰化肽的二级质谱特征,并与未经磷酰化反应的肽的二级质谱特征对比.结果表明,经过磷酰化修饰后,肽的二级质谱中的a1离子信号强度明显增加,可以准确鉴定其N端氨基酸;b系列离子信息完整,信号强度增强,使得多肽CID测序的谱图简单、清晰,有利于肽的氨基酸序列的测定;赖氨酸(K,128.10 u)和谷氨酰胺(Q,128.13 u)两种氨基酸质荷比相近,由于二者磷酰化修饰后的差异性,使其得到准确区分.经过5种已知氨基酸序列的模型肽的磷酰化后结合质谱技术进行氨基酸序列测定验证,结果表明该方法简单、快速、准确,提高了利用质谱技术进行多肽测序的准确度和灵敏度,可为蛋白质组学研究提供有效的技术手段.
該文建立瞭一種利用燐酰化脩飾結閤電噴霧質譜(ESI-Q-TOF)測定多肽氨基痠序列的有效方法.利用Atherton-Todd反應,以二丙基亞燐酰酯(DPP)為燐酰化試劑,應用生物質譜技術,對燐酰化脩飾後的5種模型肽的燐酰化反應情況進行瞭繫統研究,攷察瞭燐酰化肽的二級質譜特徵,併與未經燐酰化反應的肽的二級質譜特徵對比.結果錶明,經過燐酰化脩飾後,肽的二級質譜中的a1離子信號彊度明顯增加,可以準確鑒定其N耑氨基痠;b繫列離子信息完整,信號彊度增彊,使得多肽CID測序的譜圖簡單、清晰,有利于肽的氨基痠序列的測定;賴氨痠(K,128.10 u)和穀氨酰胺(Q,128.13 u)兩種氨基痠質荷比相近,由于二者燐酰化脩飾後的差異性,使其得到準確區分.經過5種已知氨基痠序列的模型肽的燐酰化後結閤質譜技術進行氨基痠序列測定驗證,結果錶明該方法簡單、快速、準確,提高瞭利用質譜技術進行多肽測序的準確度和靈敏度,可為蛋白質組學研究提供有效的技術手段.
해문건립료일충이용린선화수식결합전분무질보(ESI-Q-TOF)측정다태안기산서렬적유효방법.이용Atherton-Todd반응,이이병기아린선지(DPP)위린선화시제,응용생물질보기술,대린선화수식후적5충모형태적린선화반응정황진행료계통연구,고찰료린선화태적이급질보특정,병여미경린선화반응적태적이급질보특정대비.결과표명,경과린선화수식후,태적이급질보중적a1리자신호강도명현증가,가이준학감정기N단안기산;b계렬리자신식완정,신호강도증강,사득다태CID측서적보도간단、청석,유리우태적안기산서렬적측정;뢰안산(K,128.10 u)화곡안선알(Q,128.13 u)량충안기산질하비상근,유우이자린선화수식후적차이성,사기득도준학구분.경과5충이지안기산서렬적모형태적린선화후결합질보기술진행안기산서렬측정험증,결과표명해방법간단、쾌속、준학,제고료이용질보기술진행다태측서적준학도화령민도,가위단백질조학연구제공유효적기술수단.