农业现代化研究
農業現代化研究
농업현대화연구
RESEARCH OF AGRICULTURAL MODERNIZATION
2011年
5期
627-632
,共6页
杨细平%赵洋%王曼玲%朱玉兴%夏新界
楊細平%趙洋%王曼玲%硃玉興%夏新界
양세평%조양%왕만령%주옥흥%하신계
水稻%逆境%基因芯片%基因克隆%基因转化
水稻%逆境%基因芯片%基因剋隆%基因轉化
수도%역경%기인심편%기인극륭%기인전화
为了深入研究作物耐逆境胁迫的分子机制和发现新的水稻耐逆基因,采用Affymetrix基因芯片技术与水稻表达芯片(含51,279个转录本),分析了培矮64S不同生长发育时期、不同组织器官全基因组在低温、干旱、高温逆境胁迫下的表达水平变化,筛选出一批耐多逆境候选功能基因.OsMsr13是其中一个受低温、高温与干旱诱导,在各生长发育时期与组织器官均显著上调的基因.根据序列生物信息学分析,OsMsr13含有7个外显子和6个内含子,cDNA全长序列为1603bp,完整的ORF为1317bp,编码一个含438个氨基酸残基的蛋白质；在OsMsr13启动子区域发现多个与逆境应答相关的顺武作用元件；数据库查找和蛋白质多序列的比对表明Os Msr13的预测蛋白属于钙调素结合蛋白家族.为了进一步研究OsMsr13基因的功能,通过RT-PCR方法扩增到包含OsMsr13完整ORF的cDNA克隆,构建了含有OsMsr13重组基因的过量表达载体pCAM-JIT-OsMsr13,并经农杆菌介导法将重组基因导入到水稻中.转OsMsr13株系苗期的抗逆性试验表明OsMsr13过量表达能显著地提高水稻的耐寒性,但在抗旱和耐高温方面,转基因植株和野生型9311没有观察到多大差别.
為瞭深入研究作物耐逆境脅迫的分子機製和髮現新的水稻耐逆基因,採用Affymetrix基因芯片技術與水稻錶達芯片(含51,279箇轉錄本),分析瞭培矮64S不同生長髮育時期、不同組織器官全基因組在低溫、榦旱、高溫逆境脅迫下的錶達水平變化,篩選齣一批耐多逆境候選功能基因.OsMsr13是其中一箇受低溫、高溫與榦旱誘導,在各生長髮育時期與組織器官均顯著上調的基因.根據序列生物信息學分析,OsMsr13含有7箇外顯子和6箇內含子,cDNA全長序列為1603bp,完整的ORF為1317bp,編碼一箇含438箇氨基痠殘基的蛋白質；在OsMsr13啟動子區域髮現多箇與逆境應答相關的順武作用元件；數據庫查找和蛋白質多序列的比對錶明Os Msr13的預測蛋白屬于鈣調素結閤蛋白傢族.為瞭進一步研究OsMsr13基因的功能,通過RT-PCR方法擴增到包含OsMsr13完整ORF的cDNA剋隆,構建瞭含有OsMsr13重組基因的過量錶達載體pCAM-JIT-OsMsr13,併經農桿菌介導法將重組基因導入到水稻中.轉OsMsr13株繫苗期的抗逆性試驗錶明OsMsr13過量錶達能顯著地提高水稻的耐寒性,但在抗旱和耐高溫方麵,轉基因植株和野生型9311沒有觀察到多大差彆.
위료심입연구작물내역경협박적분자궤제화발현신적수도내역기인,채용Affymetrix기인심편기술여수도표체심편(함51,279개전록본),분석료배왜64S불동생장발육시기、불동조직기관전기인조재저온、간한、고온역경협박하적표체수평변화,사선출일비내다역경후선공능기인.OsMsr13시기중일개수저온、고온여간한유도,재각생장발육시기여조직기관균현저상조적기인.근거서렬생물신식학분석,OsMsr13함유7개외현자화6개내함자,cDNA전장서렬위1603bp,완정적ORF위1317bp,편마일개함438개안기산잔기적단백질；재OsMsr13계동자구역발현다개여역경응답상관적순무작용원건；수거고사조화단백질다서렬적비대표명Os Msr13적예측단백속우개조소결합단백가족.위료진일보연구OsMsr13기인적공능,통과RT-PCR방법확증도포함OsMsr13완정ORF적cDNA극륭,구건료함유OsMsr13중조기인적과량표체재체pCAM-JIT-OsMsr13,병경농간균개도법장중조기인도입도수도중.전OsMsr13주계묘기적항역성시험표명OsMsr13과량표체능현저지제고수도적내한성,단재항한화내고온방면,전기인식주화야생형9311몰유관찰도다대차별.
