中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2012年
2期
248-252
,共5页
刘镘利%王宗仁%南亚昀%马亮%马静
劉鏝利%王宗仁%南亞昀%馬亮%馬靜
류만리%왕종인%남아윤%마량%마정
中药含药血清%间质细胞%雌二醇%芳香化酶%CYP19基因%肾阳虚
中藥含藥血清%間質細胞%雌二醇%芳香化酶%CYP19基因%腎暘虛
중약함약혈청%간질세포%자이순%방향화매%CYP19기인%신양허
目的 观察温阳生精汤含药血清对腺嘌呤致雄性肾阳虚不育大鼠睾丸间质细胞中雌二醇( estradiol,E2)合成以及影响其合成的芳香化酶(cytochrome P450 aromatase,P450arom)活性、其编码基因CYP19表达的影响,从蛋白和mRNA水平探讨温阳生精汤含药血清治疗肾阳虚不育的机制.方法 将实验大鼠随机分为4组,每组5只,即正常组及温阳生精汤高、中、低浓度组.各组大鼠分别以生理盐水和高、中、低浓度中药连续灌胃10天.末次灌胃给药2h后,心脏采血,离心后分离血清.从肾阳虚大鼠体内分别分离并纯化睾丸间质细胞,经鉴定后原代培养,随机分为5组,即空白对照组,模型组,中药高、中、低浓度(1.2、1.0、0.8 g/mL)组,用放射免疫法测定细胞培养液中E2含量,氚水释放实验检测P450arom在细胞中的活性,同时用Western blot法和荧光定量PCR法分别测定CYP19蛋白和mRNA表达.结果 与空白对照组比较,模型组中间质细胞上清中E2的含量明显减少,同时伴随P450arom活性抑制,以及CYP19蛋白和mRNA表达的显著减少(P ＜0.01,P＜0.05).与模型组比较,经温阳生精汤含药血清干预后可显著增加间质细胞中E2合成量,上调P450arom活性,同时在蛋白和mRNA水平上调细胞中CYP19表达,并具有部分剂量依赖性(P＜0.01,P＜0.05).结论 温阳生精汤含药血清可以有效提高肾阳虚大鼠睾丸间质细胞中E2的合成,并可能部分通过上调P450arom活性,提高CYP19基因表达实现,这可能是其治疗男性肾阳虚不育的机制之一.
目的 觀察溫暘生精湯含藥血清對腺嘌呤緻雄性腎暘虛不育大鼠睪汍間質細胞中雌二醇( estradiol,E2)閤成以及影響其閤成的芳香化酶(cytochrome P450 aromatase,P450arom)活性、其編碼基因CYP19錶達的影響,從蛋白和mRNA水平探討溫暘生精湯含藥血清治療腎暘虛不育的機製.方法 將實驗大鼠隨機分為4組,每組5隻,即正常組及溫暘生精湯高、中、低濃度組.各組大鼠分彆以生理鹽水和高、中、低濃度中藥連續灌胃10天.末次灌胃給藥2h後,心髒採血,離心後分離血清.從腎暘虛大鼠體內分彆分離併純化睪汍間質細胞,經鑒定後原代培養,隨機分為5組,即空白對照組,模型組,中藥高、中、低濃度(1.2、1.0、0.8 g/mL)組,用放射免疫法測定細胞培養液中E2含量,氚水釋放實驗檢測P450arom在細胞中的活性,同時用Western blot法和熒光定量PCR法分彆測定CYP19蛋白和mRNA錶達.結果 與空白對照組比較,模型組中間質細胞上清中E2的含量明顯減少,同時伴隨P450arom活性抑製,以及CYP19蛋白和mRNA錶達的顯著減少(P ＜0.01,P＜0.05).與模型組比較,經溫暘生精湯含藥血清榦預後可顯著增加間質細胞中E2閤成量,上調P450arom活性,同時在蛋白和mRNA水平上調細胞中CYP19錶達,併具有部分劑量依賴性(P＜0.01,P＜0.05).結論 溫暘生精湯含藥血清可以有效提高腎暘虛大鼠睪汍間質細胞中E2的閤成,併可能部分通過上調P450arom活性,提高CYP19基因錶達實現,這可能是其治療男性腎暘虛不育的機製之一.
목적 관찰온양생정탕함약혈청대선표령치웅성신양허불육대서고환간질세포중자이순( estradiol,E2)합성이급영향기합성적방향화매(cytochrome P450 aromatase,P450arom)활성、기편마기인CYP19표체적영향,종단백화mRNA수평탐토온양생정탕함약혈청치료신양허불육적궤제.방법 장실험대서수궤분위4조,매조5지,즉정상조급온양생정탕고、중、저농도조.각조대서분별이생리염수화고、중、저농도중약련속관위10천.말차관위급약2h후,심장채혈,리심후분리혈청.종신양허대서체내분별분리병순화고환간질세포,경감정후원대배양,수궤분위5조,즉공백대조조,모형조,중약고、중、저농도(1.2、1.0、0.8 g/mL)조,용방사면역법측정세포배양액중E2함량,천수석방실험검측P450arom재세포중적활성,동시용Western blot법화형광정량PCR법분별측정CYP19단백화mRNA표체.결과 여공백대조조비교,모형조중간질세포상청중E2적함량명현감소,동시반수P450arom활성억제,이급CYP19단백화mRNA표체적현저감소(P ＜0.01,P＜0.05).여모형조비교,경온양생정탕함약혈청간예후가현저증가간질세포중E2합성량,상조P450arom활성,동시재단백화mRNA수평상조세포중CYP19표체,병구유부분제량의뢰성(P＜0.01,P＜0.05).결론 온양생정탕함약혈청가이유효제고신양허대서고환간질세포중E2적합성,병가능부분통과상조P450arom활성,제고CYP19기인표체실현,저가능시기치료남성신양허불육적궤제지일.
