CAJ | 학술논문

背景:甲醛固定石蜡包埋的标本易于保存,免疫荧光法定位定量能精确支持多种标记物.目的:建立适合于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法.方法:将取自类风湿性关节炎和无骨性关节炎患者的滑膜血管翕和髋臼增生组织的石蜡切片进行常规脱蜡复水,观察不同的柠檬酸缓冲液热修复时间、血清封闭时间、一抗浓度和荧光标记物在免疫荧光法中显色的差异.结果与结论:柠檬酸高温修复15 min 后滴加抗原修复液比单纯高温修复10～20 min,组织结构保存更为完整,且背景染色无显著区别;选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40 min 作为最佳的抗原封闭条件,既可以保证良好的封闭效果,同时又不影响一抗和抗原位点结合;较高一抗浓度(10 mg/L) 能保证明显的荧光信号、低背景和可接受的成本.进行石蜡切片免疫荧光实验,并用普通荧光显微镜观察,应避免采用FITC 等蓝色激发光、呈现绿色荧光信号的标记染料基团.提示柠檬酸高温修复15 min 后滴加抗原修复液,选择体积分数10% 二抗来源正常血清室温封闭40 min,较高一抗浓度,普通荧光显微镜观察可提高免疫荧光法的检测质量.
배경:갑철고정석사포매적표본역우보존,면역형광법정위정량능정학지지다충표기물.목적:건립괄합우갑철고정석사포매조직적개량면역형광법.방법:장취자류풍습성관절염화무골성관절염환자적활막혈관흡화관구증생조직적석사절편진행상규탈사복수,관찰불동적저몽산완충액열수복시간、혈청봉폐시간、일항농도화형광표기물재면역형광법중현색적차이.결과여결론:저몽산고온수복15 min 후적가항원수복액비단순고온수복10～20 min,조직결구보존경위완정,차배경염색무현저구별;선택체적분수10%이항래원정상혈청실온봉폐40 min 작위최가적항원봉폐조건,기가이보증량호적봉폐효과,동시우불영향일항화항원위점결합;교고일항농도(10 mg/L) 능보증명현적형광신호、저배경화가접수적성본.진행석사절편면역형광실험,병용보통형광현미경관찰,응피면채용FITC 등람색격발광、정현록색형광신호적표기염료기단.제시저몽산고온수복15 min 후적가항원수복액,선택체적분수10% 이항래원정상혈청실온봉폐40 min,교고일항농도,보통형광현미경관찰가제고면역형광법적검측질량.