国际流行病学传染病学杂志
國際流行病學傳染病學雜誌
국제류행병학전염병학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF EPIDEMIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASE
2007年
6期
363-366
,共4页
宋广忠%石君帆%杨明瑾%漏磊君%沈丽英%John T. Belisle
宋廣忠%石君帆%楊明瑾%漏磊君%瀋麗英%John T. Belisle
송엄충%석군범%양명근%루뢰군%침려영%John T. Belisle
结核%rCFP-10%血清学诊断%亚单位疫苗
結覈%rCFP-10%血清學診斷%亞單位疫苗
결핵%rCFP-10%혈청학진단%아단위역묘
目的 表达、纯化结核分枝杆菌H37Rv株重组蛋白CFP-10(rCFP-10),为结核病血清学诊断价值的研究及亚单位疫苗的研制提供物质基础.方法 重组质粒pET23b-CFP-10转化E.coli表达菌株BL21(DE3)pLysE,IPTG诱导rCFP-10表达.经SDS-PAGE电泳和Western印迹法鉴定后,优化表达条件用镍离子螯合亲和层析柱HisTrapTMHP纯化重组蛋白,最后用斑点金免疫渗滤法初步评价纯化蛋白的免疫反应性.结果 成功构建了重组质粒pET23b-CFP-10,并且rCFP-10以可溶性形式高效表达,表达量约占菌体总蛋白的10%.经亲和层析后得到高纯度有免疫反应性的重组蛋白(纯度约为98.5%).结论 高纯度有免疫反应性的rCFP-10为新型亚单位疫苗的研发及其结核病血清学诊断价值的研究奠定了基础.
目的 錶達、純化結覈分枝桿菌H37Rv株重組蛋白CFP-10(rCFP-10),為結覈病血清學診斷價值的研究及亞單位疫苗的研製提供物質基礎.方法 重組質粒pET23b-CFP-10轉化E.coli錶達菌株BL21(DE3)pLysE,IPTG誘導rCFP-10錶達.經SDS-PAGE電泳和Western印跡法鑒定後,優化錶達條件用鎳離子螯閤親和層析柱HisTrapTMHP純化重組蛋白,最後用斑點金免疫滲濾法初步評價純化蛋白的免疫反應性.結果 成功構建瞭重組質粒pET23b-CFP-10,併且rCFP-10以可溶性形式高效錶達,錶達量約佔菌體總蛋白的10%.經親和層析後得到高純度有免疫反應性的重組蛋白(純度約為98.5%).結論 高純度有免疫反應性的rCFP-10為新型亞單位疫苗的研髮及其結覈病血清學診斷價值的研究奠定瞭基礎.
목적 표체、순화결핵분지간균H37Rv주중조단백CFP-10(rCFP-10),위결핵병혈청학진단개치적연구급아단위역묘적연제제공물질기출.방법 중조질립pET23b-CFP-10전화E.coli표체균주BL21(DE3)pLysE,IPTG유도rCFP-10표체.경SDS-PAGE전영화Western인적법감정후,우화표체조건용얼리자오합친화층석주HisTrapTMHP순화중조단백,최후용반점금면역삼려법초보평개순화단백적면역반응성.결과 성공구건료중조질립pET23b-CFP-10,병차rCFP-10이가용성형식고효표체,표체량약점균체총단백적10%.경친화층석후득도고순도유면역반응성적중조단백(순도약위98.5%).결론 고순도유면역반응성적rCFP-10위신형아단위역묘적연발급기결핵병혈청학진단개치적연구전정료기출.
