眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2010年
6期
519-523
,共5页
视网膜色素上皮细胞%转化生长因子-β2%磷脂酶抑制剂%腺苷酸环化酶抑制剂
視網膜色素上皮細胞%轉化生長因子-β2%燐脂酶抑製劑%腺苷痠環化酶抑製劑
시망막색소상피세포%전화생장인자-β2%린지매억제제%선감산배화매억제제
目的 观察磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122和腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536对豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞增生及分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)的影响.方法 胰蛋白酶消化法培养原代豚鼠RPE细胞,角蛋白免疫组织化学染色鉴定为阳性后,传2代细胞用于实验.实验组加入含不同浓度U73122或SQ22536的培养液,设溶剂对照.24 h后观察RPE细胞形态,噻唑蓝(MTT)法检测加入不同浓度U73122后RPE细胞的增生情况.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测1×10-5 mol/L U73122及SQ22536作用2、4、6、8、16 h后细胞培养液中TGF-β2的分泌量.结果 培养的RPE细胞通过角蛋白染色后呈棕黄色阳性反应.MTT法检测显示,U73122实验组中除5×10-6 mol/L浓度组外,其余各浓度组OD值与对照组比较均显著下降,且随着浓度的增加,OD值下降越明显(P＜0.05);SQ22536各浓度组与对照组OD值相比差异均无统计学意义(F=1.316,P＞0.05).ELISA结果显示,加入1×10-5 mol/L U73122后2h实验组TGF-β2的分泌量与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),4、6、8、16h后,实验组较对照组及2 h组均明显增加(P＜0.05);而SQ22536组RPE细胞TGF-β2的分泌量在2、4、6、16h比较差异无统计学意义(P＞0.05),8h时分泌量降低.结论 PLC抑制剂U73122能抑制RPE细胞的增生,并可使RPE细胞分泌TGF-β2增加.AC抑制剂SQ22536对RPE细胞的生长和TGF-β2的分泌无明显影响.提示RPE细胞分泌TGF-β2的调控可能与PLC信号转导途径有关.
目的 觀察燐脂酶C(PLC)抑製劑U73122和腺苷痠環化酶(AC)抑製劑SQ22536對豚鼠視網膜色素上皮(RPE)細胞增生及分泌轉化生長因子-β2(TGF-β2)的影響.方法 胰蛋白酶消化法培養原代豚鼠RPE細胞,角蛋白免疫組織化學染色鑒定為暘性後,傳2代細胞用于實驗.實驗組加入含不同濃度U73122或SQ22536的培養液,設溶劑對照.24 h後觀察RPE細胞形態,噻唑藍(MTT)法檢測加入不同濃度U73122後RPE細胞的增生情況.酶聯免疫吸附實驗(ELISA)檢測1×10-5 mol/L U73122及SQ22536作用2、4、6、8、16 h後細胞培養液中TGF-β2的分泌量.結果 培養的RPE細胞通過角蛋白染色後呈棕黃色暘性反應.MTT法檢測顯示,U73122實驗組中除5×10-6 mol/L濃度組外,其餘各濃度組OD值與對照組比較均顯著下降,且隨著濃度的增加,OD值下降越明顯(P＜0.05);SQ22536各濃度組與對照組OD值相比差異均無統計學意義(F=1.316,P＞0.05).ELISA結果顯示,加入1×10-5 mol/L U73122後2h實驗組TGF-β2的分泌量與對照組比較,差異無統計學意義(P＞0.05),4、6、8、16h後,實驗組較對照組及2 h組均明顯增加(P＜0.05);而SQ22536組RPE細胞TGF-β2的分泌量在2、4、6、16h比較差異無統計學意義(P＞0.05),8h時分泌量降低.結論 PLC抑製劑U73122能抑製RPE細胞的增生,併可使RPE細胞分泌TGF-β2增加.AC抑製劑SQ22536對RPE細胞的生長和TGF-β2的分泌無明顯影響.提示RPE細胞分泌TGF-β2的調控可能與PLC信號轉導途徑有關.
목적 관찰린지매C(PLC)억제제U73122화선감산배화매(AC)억제제SQ22536대돈서시망막색소상피(RPE)세포증생급분비전화생장인자-β2(TGF-β2)적영향.방법 이단백매소화법배양원대돈서RPE세포,각단백면역조직화학염색감정위양성후,전2대세포용우실험.실험조가입함불동농도U73122혹SQ22536적배양액,설용제대조.24 h후관찰RPE세포형태,새서람(MTT)법검측가입불동농도U73122후RPE세포적증생정황.매련면역흡부실험(ELISA)검측1×10-5 mol/L U73122급SQ22536작용2、4、6、8、16 h후세포배양액중TGF-β2적분비량.결과 배양적RPE세포통과각단백염색후정종황색양성반응.MTT법검측현시,U73122실험조중제5×10-6 mol/L농도조외,기여각농도조OD치여대조조비교균현저하강,차수착농도적증가,OD치하강월명현(P＜0.05);SQ22536각농도조여대조조OD치상비차이균무통계학의의(F=1.316,P＞0.05).ELISA결과현시,가입1×10-5 mol/L U73122후2h실험조TGF-β2적분비량여대조조비교,차이무통계학의의(P＞0.05),4、6、8、16h후,실험조교대조조급2 h조균명현증가(P＜0.05);이SQ22536조RPE세포TGF-β2적분비량재2、4、6、16h비교차이무통계학의의(P＞0.05),8h시분비량강저.결론 PLC억제제U73122능억제RPE세포적증생,병가사RPE세포분비TGF-β2증가.AC억제제SQ22536대RPE세포적생장화TGF-β2적분비무명현영향.제시RPE세포분비TGF-β2적조공가능여PLC신호전도도경유관.
