中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2007年
1期
82-83
,共2页
何云锋%吴小候%罗春丽%田代印
何雲鋒%吳小候%囉春麗%田代印
하운봉%오소후%라춘려%전대인
质粒%RNA%转染
質粒%RNA%轉染
질립%RNA%전염
目的 构建△Np63特异性短发卡RNA(shRNA)表达质粒,检测△Np63-shRNA对膀胱移行细胞癌(TCCB)细胞株5637中△Np63信使RNA(mRNA)表达的抑制作用.方法 设计合成△Np63 shRNA短链寡核苷酸,克隆到Pgenesil-1质粒载体中,构建△Np63特异shRNA表达质粒,在转染试剂介导下转染5637细胞,6孔板每孔加入0.4μg质粒.半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测△Np63 mRNA表达水平.结果 经PstI+SalI双酶切及测序鉴定△Np63-shRNA表达质粒构建成功.在受转染的5637细胞内△Np63-shRNA干预组△Np63 mRNA水平明显低于control组与PBS组(P＜0.05),与control组和PBS组比较抑制率分别为57.3%和63.0%.结论 △Np63特异性shRNA在5637细胞中对△Np63 mRNA表达显示出很好的抑制作用.
目的 構建△Np63特異性短髮卡RNA(shRNA)錶達質粒,檢測△Np63-shRNA對膀胱移行細胞癌(TCCB)細胞株5637中△Np63信使RNA(mRNA)錶達的抑製作用.方法 設計閤成△Np63 shRNA短鏈寡覈苷痠,剋隆到Pgenesil-1質粒載體中,構建△Np63特異shRNA錶達質粒,在轉染試劑介導下轉染5637細胞,6孔闆每孔加入0.4μg質粒.半定量逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測△Np63 mRNA錶達水平.結果 經PstI+SalI雙酶切及測序鑒定△Np63-shRNA錶達質粒構建成功.在受轉染的5637細胞內△Np63-shRNA榦預組△Np63 mRNA水平明顯低于control組與PBS組(P＜0.05),與control組和PBS組比較抑製率分彆為57.3%和63.0%.結論 △Np63特異性shRNA在5637細胞中對△Np63 mRNA錶達顯示齣很好的抑製作用.
목적 구건△Np63특이성단발잡RNA(shRNA)표체질립,검측△Np63-shRNA대방광이행세포암(TCCB)세포주5637중△Np63신사RNA(mRNA)표체적억제작용.방법 설계합성△Np63 shRNA단련과핵감산,극륭도Pgenesil-1질립재체중,구건△Np63특이shRNA표체질립,재전염시제개도하전염5637세포,6공판매공가입0.4μg질립.반정량역전록-취합매련반응(RT-PCR)방법검측△Np63 mRNA표체수평.결과 경PstI+SalI쌍매절급측서감정△Np63-shRNA표체질립구건성공.재수전염적5637세포내△Np63-shRNA간예조△Np63 mRNA수평명현저우control조여PBS조(P＜0.05),여control조화PBS조비교억제솔분별위57.3%화63.0%.결론 △Np63특이성shRNA재5637세포중대△Np63 mRNA표체현시출흔호적억제작용.
