中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2007年
11期
807-810
,共4页
吴雪伶%张春涛%刘春雨%聂建辉%种辉辉%王佑春
吳雪伶%張春濤%劉春雨%聶建輝%種輝輝%王祐春
오설령%장춘도%류춘우%섭건휘%충휘휘%왕우춘
颗粒酶B%原核表达%抗原性
顆粒酶B%原覈錶達%抗原性
과립매B%원핵표체%항원성
目的 在原核系统表达人颗粒酶B(GrB)酶原型及活性型基因,并分析表达产物的抗原性.方法 从人外周血淋巴细胞中抽提RNA,用RT-PCR方法扩增人颗粒酶B序列,将其克隆至pGEX-5x-1表达质粒,与GST进行融合表达,用SDSPAGE及Western blot对表达产物进行分析.结果 所克隆的GrB序列与已报道的从人体分离出的GrB完全一致.酶原型和活性型GrB与GST的融合蛋白以包涵体的形式表达,其大小与预期结果一致,并能与GrB特异性抗体发生结合反应.结论 已成功构建了GrB原核表达系统,酶原型及活性型GrB均具有抗原性.
目的 在原覈繫統錶達人顆粒酶B(GrB)酶原型及活性型基因,併分析錶達產物的抗原性.方法 從人外週血淋巴細胞中抽提RNA,用RT-PCR方法擴增人顆粒酶B序列,將其剋隆至pGEX-5x-1錶達質粒,與GST進行融閤錶達,用SDSPAGE及Western blot對錶達產物進行分析.結果 所剋隆的GrB序列與已報道的從人體分離齣的GrB完全一緻.酶原型和活性型GrB與GST的融閤蛋白以包涵體的形式錶達,其大小與預期結果一緻,併能與GrB特異性抗體髮生結閤反應.結論 已成功構建瞭GrB原覈錶達繫統,酶原型及活性型GrB均具有抗原性.
목적 재원핵계통표체인과립매B(GrB)매원형급활성형기인,병분석표체산물적항원성.방법 종인외주혈림파세포중추제RNA,용RT-PCR방법확증인과립매B서렬,장기극륭지pGEX-5x-1표체질립,여GST진행융합표체,용SDSPAGE급Western blot대표체산물진행분석.결과 소극륭적GrB서렬여이보도적종인체분리출적GrB완전일치.매원형화활성형GrB여GST적융합단백이포함체적형식표체,기대소여예기결과일치,병능여GrB특이성항체발생결합반응.결론 이성공구건료GrB원핵표체계통,매원형급활성형GrB균구유항원성.
