山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
23期
25-27
,共3页
李国庆%张卫泽%马凌%陈永清%秦勉%韩娟萍%张耀辉
李國慶%張衛澤%馬凌%陳永清%秦勉%韓娟萍%張耀輝
리국경%장위택%마릉%진영청%진면%한연평%장요휘
干细胞%5-氮胞苷%诱导%分化%心肌样细胞%血清浓度
榦細胞%5-氮胞苷%誘導%分化%心肌樣細胞%血清濃度
간세포%5-담포감%유도%분화%심기양세포%혈청농도
目的 观察脂肪间充质干细胞(ADMSCs)向心肌样细胞诱导分化的适宜培养基血清浓度.方法 采用Ⅰ型胶原酶消化法自成人脂肪组织分离ADMSCs进行培养.对第3代细胞以10 μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)诱导作用24 h,用含10%、5%胎牛血清的完全培养基继续培养,镜下观察细胞形态学变化,采用免疫细胞化学染色鉴定心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI),计算心肌细胞转化率,采用RT-PCR方法 检测NKX2.5、GATA4及cTnI基因表达.结果 5-aza诱导ADMSCs后7 d细胞形态及排列开始发生变化,4周后可见极个别细胞出现细微搏动, 10%、5%胎牛血清培养下心肌样细胞转化率分别为31.5%±4.2%、32.8%±5.0%,P=0.72;RT-PCR产物条带见NKX2.5、GATA4及cTnI基因表达.结论 ADMSCs在5-aza诱导后于低浓度血清培养基中培养效果更好.
目的 觀察脂肪間充質榦細胞(ADMSCs)嚮心肌樣細胞誘導分化的適宜培養基血清濃度.方法 採用Ⅰ型膠原酶消化法自成人脂肪組織分離ADMSCs進行培養.對第3代細胞以10 μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)誘導作用24 h,用含10%、5%胎牛血清的完全培養基繼續培養,鏡下觀察細胞形態學變化,採用免疫細胞化學染色鑒定心肌特異性肌鈣蛋白I(cTnI),計算心肌細胞轉化率,採用RT-PCR方法 檢測NKX2.5、GATA4及cTnI基因錶達.結果 5-aza誘導ADMSCs後7 d細胞形態及排列開始髮生變化,4週後可見極箇彆細胞齣現細微搏動, 10%、5%胎牛血清培養下心肌樣細胞轉化率分彆為31.5%±4.2%、32.8%±5.0%,P=0.72;RT-PCR產物條帶見NKX2.5、GATA4及cTnI基因錶達.結論 ADMSCs在5-aza誘導後于低濃度血清培養基中培養效果更好.
목적 관찰지방간충질간세포(ADMSCs)향심기양세포유도분화적괄의배양기혈청농도.방법 채용Ⅰ형효원매소화법자성인지방조직분리ADMSCs진행배양.대제3대세포이10 μmol/L적5-담포감(5-aza)유도작용24 h,용함10%、5%태우혈청적완전배양기계속배양,경하관찰세포형태학변화,채용면역세포화학염색감정심기특이성기개단백I(cTnI),계산심기세포전화솔,채용RT-PCR방법 검측NKX2.5、GATA4급cTnI기인표체.결과 5-aza유도ADMSCs후7 d세포형태급배렬개시발생변화,4주후가견겁개별세포출현세미박동, 10%、5%태우혈청배양하심기양세포전화솔분별위31.5%±4.2%、32.8%±5.0%,P=0.72;RT-PCR산물조대견NKX2.5、GATA4급cTnI기인표체.결론 ADMSCs재5-aza유도후우저농도혈청배양기중배양효과경호.
