齐鲁医学杂志
齊魯醫學雜誌
제로의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF QILU
2010年
3期
235-237
,共3页
杨文玖%邹云雯%王志杰%褚言琛
楊文玖%鄒雲雯%王誌傑%褚言琛
양문구%추운문%왕지걸%저언침
肿瘤坏死因子α%NIH3T3细胞%胶原%基质溶解素1
腫瘤壞死因子α%NIH3T3細胞%膠原%基質溶解素1
종류배사인자α%NIH3T3세포%효원%기질용해소1
目的 探讨肿瘤坏死因子-α (TNF-α)对NIH3T3细胞成熟化所起的作用.方法 体外培养NIH3T3成纤维细胞,将细胞分为空白对照组(A组)、TNF-α组(B组)及TNF-α+Anti-TNFRSF1B组(C组).细胞制成 2×108/L的细胞悬液后,接种于25 cm2培养瓶中,待细胞呈汇合状态时,换用无血清DMEM高糖培养基培养12～16 h.然后A组换用含体积分数0.02胎牛血清的DMEM高糖培养基继续培养;B组换用含100 μg/L TNF-α的培养基培养;C组先加入浓度为50 μg/L的Anti-TNFRSF1B作用1 h后,倒出培养基后再加入含100 μg/L TNF-α的培养基继续培养.然后采用RT-PCR方法测定各组Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶3(MMP3)mRNA的表达,Western Blot方法测定各组Ⅰ型胶原蛋白和MMP3蛋白的表达.结果 B、C组 MMP3 mRNA及蛋白的表达较A组升高,差异均有显著意义(t=-13.413～5.076,P<0.05);B组较C组升高,差异也具有显著意义(t=4.441～5.076,P<0.01);B、C组Ⅰ型胶原的表达较A组降低,差异也均有显著性(t=-4.950～5.808,P<0.05),B组较C组降低,差异也均有显著性(t=-4.950～-3.823,P<0.05).结论 TNF-α可促进NIH3T3细胞活化.
目的 探討腫瘤壞死因子-α (TNF-α)對NIH3T3細胞成熟化所起的作用.方法 體外培養NIH3T3成纖維細胞,將細胞分為空白對照組(A組)、TNF-α組(B組)及TNF-α+Anti-TNFRSF1B組(C組).細胞製成 2×108/L的細胞懸液後,接種于25 cm2培養瓶中,待細胞呈彙閤狀態時,換用無血清DMEM高糖培養基培養12～16 h.然後A組換用含體積分數0.02胎牛血清的DMEM高糖培養基繼續培養;B組換用含100 μg/L TNF-α的培養基培養;C組先加入濃度為50 μg/L的Anti-TNFRSF1B作用1 h後,倒齣培養基後再加入含100 μg/L TNF-α的培養基繼續培養.然後採用RT-PCR方法測定各組Ⅰ型膠原和基質金屬蛋白酶3(MMP3)mRNA的錶達,Western Blot方法測定各組Ⅰ型膠原蛋白和MMP3蛋白的錶達.結果 B、C組 MMP3 mRNA及蛋白的錶達較A組升高,差異均有顯著意義(t=-13.413～5.076,P<0.05);B組較C組升高,差異也具有顯著意義(t=4.441～5.076,P<0.01);B、C組Ⅰ型膠原的錶達較A組降低,差異也均有顯著性(t=-4.950～5.808,P<0.05),B組較C組降低,差異也均有顯著性(t=-4.950～-3.823,P<0.05).結論 TNF-α可促進NIH3T3細胞活化.
목적 탐토종류배사인자-α (TNF-α)대NIH3T3세포성숙화소기적작용.방법 체외배양NIH3T3성섬유세포,장세포분위공백대조조(A조)、TNF-α조(B조)급TNF-α+Anti-TNFRSF1B조(C조).세포제성 2×108/L적세포현액후,접충우25 cm2배양병중,대세포정회합상태시,환용무혈청DMEM고당배양기배양12～16 h.연후A조환용함체적분수0.02태우혈청적DMEM고당배양기계속배양;B조환용함100 μg/L TNF-α적배양기배양;C조선가입농도위50 μg/L적Anti-TNFRSF1B작용1 h후,도출배양기후재가입함100 μg/L TNF-α적배양기계속배양.연후채용RT-PCR방법측정각조Ⅰ형효원화기질금속단백매3(MMP3)mRNA적표체,Western Blot방법측정각조Ⅰ형효원단백화MMP3단백적표체.결과 B、C조 MMP3 mRNA급단백적표체교A조승고,차이균유현저의의(t=-13.413～5.076,P<0.05);B조교C조승고,차이야구유현저의의(t=4.441～5.076,P<0.01);B、C조Ⅰ형효원적표체교A조강저,차이야균유현저성(t=-4.950～5.808,P<0.05),B조교C조강저,차이야균유현저성(t=-4.950～-3.823,P<0.05).결론 TNF-α가촉진NIH3T3세포활화.
