临床医学工程
臨床醫學工程
림상의학공정
CLINICAL MEDICAL ENGINEERING
2010年
10期
12-14
,共3页
王敏%程政%姚天华%代泉%郭秀全
王敏%程政%姚天華%代泉%郭秀全
왕민%정정%요천화%대천%곽수전
rAAV-hBMP2-GFP%AAV-HT1080细胞%感染滴度%测定
rAAV-hBMP2-GFP%AAV-HT1080細胞%感染滴度%測定
rAAV-hBMP2-GFP%AAV-HT1080세포%감염적도%측정
目的 建立携骨形态发生蛋白2基因的重组腺相关病毒载体(rAAV-hBMP2-GFP)感染滴度测定的 方法 ,并制备高滴度的rAAV-hBMP2一GFP病毒液,为进一步实验hBMP2诱导大鼠牙槽骨骨缺损修复的基因治疗提供有利的工具. 方法 通过分析腺相关病毒-HT1080(AAV-HT1080)细胞接种量、培养时间及病毒吸附时间等参数,建立应用荧光计数法测定rAAV-hBMP2-GFP病毒感染滴度的 方法.并分析其精密性及检测病毒的稳定性. 结果 AAV-HT1080细胞的最佳接种浓度、培养时间及病毒吸附时间分别为3×105个/孔、24 h及48 h,在此条件下收获的病毒液的感染滴度最高可达3.82×1011/ml,所建立的荧光计数检测 方法 精密性较好.制备的病毒液的平均感染滴度为3.60 X 1011/ml,4℃和37 ℃保存7 d及反复冻融5次,稳定性良好. 结论 建立了rAAV-hBMP2-GFP感染滴度的测定 方法 ,并制备了高滴度及滴度稳定的rAAV-hBMP2-GFP病毒液.
目的 建立攜骨形態髮生蛋白2基因的重組腺相關病毒載體(rAAV-hBMP2-GFP)感染滴度測定的 方法 ,併製備高滴度的rAAV-hBMP2一GFP病毒液,為進一步實驗hBMP2誘導大鼠牙槽骨骨缺損脩複的基因治療提供有利的工具. 方法 通過分析腺相關病毒-HT1080(AAV-HT1080)細胞接種量、培養時間及病毒吸附時間等參數,建立應用熒光計數法測定rAAV-hBMP2-GFP病毒感染滴度的 方法.併分析其精密性及檢測病毒的穩定性. 結果 AAV-HT1080細胞的最佳接種濃度、培養時間及病毒吸附時間分彆為3×105箇/孔、24 h及48 h,在此條件下收穫的病毒液的感染滴度最高可達3.82×1011/ml,所建立的熒光計數檢測 方法 精密性較好.製備的病毒液的平均感染滴度為3.60 X 1011/ml,4℃和37 ℃保存7 d及反複凍融5次,穩定性良好. 結論 建立瞭rAAV-hBMP2-GFP感染滴度的測定 方法 ,併製備瞭高滴度及滴度穩定的rAAV-hBMP2-GFP病毒液.
목적 건립휴골형태발생단백2기인적중조선상관병독재체(rAAV-hBMP2-GFP)감염적도측정적 방법 ,병제비고적도적rAAV-hBMP2일GFP병독액,위진일보실험hBMP2유도대서아조골골결손수복적기인치료제공유리적공구. 방법 통과분석선상관병독-HT1080(AAV-HT1080)세포접충량、배양시간급병독흡부시간등삼수,건립응용형광계수법측정rAAV-hBMP2-GFP병독감염적도적 방법.병분석기정밀성급검측병독적은정성. 결과 AAV-HT1080세포적최가접충농도、배양시간급병독흡부시간분별위3×105개/공、24 h급48 h,재차조건하수획적병독액적감염적도최고가체3.82×1011/ml,소건립적형광계수검측 방법 정밀성교호.제비적병독액적평균감염적도위3.60 X 1011/ml,4℃화37 ℃보존7 d급반복동융5차,은정성량호. 결론 건립료rAAV-hBMP2-GFP감염적도적측정 방법 ,병제비료고적도급적도은정적rAAV-hBMP2-GFP병독액.
