中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
1期
88-91
,共4页
向智龙%程振涛%卓建华%周碧君%欧德渊%鲜思美%刘芳%冉光鑫
嚮智龍%程振濤%卓建華%週碧君%歐德淵%鮮思美%劉芳%冉光鑫
향지룡%정진도%탁건화%주벽군%구덕연%선사미%류방%염광흠
山羊痘病毒%羊口疮病毒%双重PCR%检测
山羊痘病毒%羊口瘡病毒%雙重PCR%檢測
산양두병독%양구창병독%쌍중PCR%검측
根据GenBank发表的山羊痘病毒(goatpox virus,GPV)和羊口疮病毒(orf virus,ORFV)基因序列,分别合成针对GPV ITR和ORFV H2L基因片段的2对引物,以GPV和ORFV的核酸混合物作为模板,经优化反应条件,成功建立了快速鉴别检测GPV、ORFV的双重PCR方法.特异性试验结果显示,该方法对GPV与ORFV核酸的扩增能获得289和507 bp的特异性目的片段,而对FMDV、FPV、BTV、健康山羊皮肤的核酸扩增均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对GPV核酸的最小检出量为4 Pg,对ORFV核酸为0.4 pg;对临床采集的12份病料进行双重PCR扩增,GPV检出率为25%(3/12),ORFV的检出率为75%(9/12).结果表明,建立的双重PCR方法具有特异性强、敏感性高、快速简便等特点,可用于GPV 或/和ORFV 临床感染病例的联合检测与鉴别诊断.
根據GenBank髮錶的山羊痘病毒(goatpox virus,GPV)和羊口瘡病毒(orf virus,ORFV)基因序列,分彆閤成針對GPV ITR和ORFV H2L基因片段的2對引物,以GPV和ORFV的覈痠混閤物作為模闆,經優化反應條件,成功建立瞭快速鑒彆檢測GPV、ORFV的雙重PCR方法.特異性試驗結果顯示,該方法對GPV與ORFV覈痠的擴增能穫得289和507 bp的特異性目的片段,而對FMDV、FPV、BTV、健康山羊皮膚的覈痠擴增均為陰性;敏感性試驗結果顯示,該方法對GPV覈痠的最小檢齣量為4 Pg,對ORFV覈痠為0.4 pg;對臨床採集的12份病料進行雙重PCR擴增,GPV檢齣率為25%(3/12),ORFV的檢齣率為75%(9/12).結果錶明,建立的雙重PCR方法具有特異性彊、敏感性高、快速簡便等特點,可用于GPV 或/和ORFV 臨床感染病例的聯閤檢測與鑒彆診斷.
근거GenBank발표적산양두병독(goatpox virus,GPV)화양구창병독(orf virus,ORFV)기인서렬,분별합성침대GPV ITR화ORFV H2L기인편단적2대인물,이GPV화ORFV적핵산혼합물작위모판,경우화반응조건,성공건립료쾌속감별검측GPV、ORFV적쌍중PCR방법.특이성시험결과현시,해방법대GPV여ORFV핵산적확증능획득289화507 bp적특이성목적편단,이대FMDV、FPV、BTV、건강산양피부적핵산확증균위음성;민감성시험결과현시,해방법대GPV핵산적최소검출량위4 Pg,대ORFV핵산위0.4 pg;대림상채집적12빈병료진행쌍중PCR확증,GPV검출솔위25%(3/12),ORFV적검출솔위75%(9/12).결과표명,건립적쌍중PCR방법구유특이성강、민감성고、쾌속간편등특점,가용우GPV 혹/화ORFV 림상감염병례적연합검측여감별진단.
