CAJ | 학술논문

目的:观察体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)在TGF-β1刺激下骨膜素(periostin)的表达情况及其与平滑肌细胞迁移、增殖等的关系；观察阿托伐他汀对上述过程的影响并初步探讨其抑制periostin表达的分子机制.方法:采用组织块贴壁培养法进行血管平滑肌细胞的原代培养,取3～6代细胞用于实验.采用10 ng/mL TGF-β1刺激VSMC,并用不同浓度阿托伐他汀(0.1,1.0,10.0μmol/L)以及Rho激酶抑制剂Y-27632、甲羟戊酸(MVA)+10.0μmol/L阿托伐他汀干预,24 h后用RT-PCR及Western印迹法检测VSMC中periostin mRNA和蛋白的表达；用Boyden趋化小室测试细胞迁移情况,用MTT法测定细胞增殖情况.结果:大鼠VSMC在TGF-β1刺激下periostin蛋白表达明显增加(4.158±0.515 vs 0.385±0.031),且VSMC迁移数(25±4 vs 8±2)及增殖率(0.85±0.06 vs 0.32±0.03)明显增加,阿托伐他汀呈浓度依赖性抑制大鼠VSMC在TGF-β1诱导下的periostin表达及抑制VSMC的迁移率及增殖率；Rho激酶抑制剂Y-27632可明显降低大鼠VSMC在TGF-β1诱导下的periostin表达(2.082±0.245);加入MVA后,阿托伐他汀对TGF-β1促进大鼠VSMC中periostin表达的抑制作用明显降低(3.838±0.326).结论:Periostin可促进大鼠VSMC的迁移和增殖,阿托伐他汀可能是通过抑制MVA等类异戊二烯的生成,阻断Rho/Rho激酶信号通路,进而抑制TGF-β1诱导的VSMC中periostin的表达.
목적:관찰체외배양대서주동맥평활기세포(VSMC)재TGF-β1자격하골막소(periostin)적표체정황급기여평활기세포천이、증식등적관계；관찰아탁벌타정대상술과정적영향병초보탐토기억제periostin표체적분자궤제.방법:채용조직괴첩벽배양법진행혈관평활기세포적원대배양,취3～6대세포용우실험.채용10 ng/mL TGF-β1자격VSMC,병용불동농도아탁벌타정(0.1,1.0,10.0μmol/L)이급Rho격매억제제Y-27632、갑간무산(MVA)+10.0μmol/L아탁벌타정간예,24 h후용RT-PCR급Western인적법검측VSMC중periostin mRNA화단백적표체；용Boyden추화소실측시세포천이정황,용MTT법측정세포증식정황.결과:대서VSMC재TGF-β1자격하periostin단백표체명현증가(4.158±0.515 vs 0.385±0.031),차VSMC천이수(25±4 vs 8±2)급증식솔(0.85±0.06 vs 0.32±0.03)명현증가,아탁벌타정정농도의뢰성억제대서VSMC재TGF-β1유도하적periostin표체급억제VSMC적천이솔급증식솔；Rho격매억제제Y-27632가명현강저대서VSMC재TGF-β1유도하적periostin표체(2.082±0.245);가입MVA후,아탁벌타정대TGF-β1촉진대서VSMC중periostin표체적억제작용명현강저(3.838±0.326).결론:Periostin가촉진대서VSMC적천이화증식,아탁벌타정가능시통과억제MVA등류이무이희적생성,조단Rho/Rho격매신호통로,진이억제TGF-β1유도적VSMC중periostin적표체.