四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2012年
4期
901-908
,共8页
凃丽%于广欣%陈波%曲芳兵%冷鹂%兰利琼%卿人韦
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三角褐指藻%二酰基甘油转移酶%RNAi%油脂积累%生物柴油
三角褐指藻%二酰基甘油轉移酶%RNAi%油脂積纍%生物柴油
삼각갈지조%이선기감유전이매%RNAi%유지적루%생물시유
本文应用RT-PCR和RACE方法扩增出三角褐指藻二酰基甘油转移酶(Ptdgat)全长cDNA,其完整编码框(ORF)为1587 bp,编码528个氨基酸.基于克隆所得Ptdgat的ORF构建了反向互补RNA干扰载体,并用基因枪PDS-1000/He转化野生型三角褐指藻,筛选到了所需的阳性转基因藻.实时荧光定量PCR (qPCR)结果揭示:含Ptdgat RNA干扰结构的转基因藻的二酰基甘油转移酶的表达水平比野生型三角褐指藻该酶的表达水平有显著降低；野生型藻和转基因藻的油脂含量定量分析结果揭示:含RNAi干扰结构的转基因三角褐指藻油脂含量也明显低于野生型三角褐指藻.另外本文也揭示了适当浓度的外源培养因子铁、硅和脱落酸(ABA)提高了三角褐指藻Ptdgat基因的表达水平及其油脂含量.
本文應用RT-PCR和RACE方法擴增齣三角褐指藻二酰基甘油轉移酶(Ptdgat)全長cDNA,其完整編碼框(ORF)為1587 bp,編碼528箇氨基痠.基于剋隆所得Ptdgat的ORF構建瞭反嚮互補RNA榦擾載體,併用基因鎗PDS-1000/He轉化野生型三角褐指藻,篩選到瞭所需的暘性轉基因藻.實時熒光定量PCR (qPCR)結果揭示:含Ptdgat RNA榦擾結構的轉基因藻的二酰基甘油轉移酶的錶達水平比野生型三角褐指藻該酶的錶達水平有顯著降低；野生型藻和轉基因藻的油脂含量定量分析結果揭示:含RNAi榦擾結構的轉基因三角褐指藻油脂含量也明顯低于野生型三角褐指藻.另外本文也揭示瞭適噹濃度的外源培養因子鐵、硅和脫落痠(ABA)提高瞭三角褐指藻Ptdgat基因的錶達水平及其油脂含量.
본문응용RT-PCR화RACE방법확증출삼각갈지조이선기감유전이매(Ptdgat)전장cDNA,기완정편마광(ORF)위1587 bp,편마528개안기산.기우극륭소득Ptdgat적ORF구건료반향호보RNA간우재체,병용기인창PDS-1000/He전화야생형삼각갈지조,사선도료소수적양성전기인조.실시형광정량PCR (qPCR)결과게시:함Ptdgat RNA간우결구적전기인조적이선기감유전이매적표체수평비야생형삼각갈지조해매적표체수평유현저강저；야생형조화전기인조적유지함량정량분석결과게시:함RNAi간우결구적전기인삼각갈지조유지함량야명현저우야생형삼각갈지조.령외본문야게시료괄당농도적외원배양인자철、규화탈락산(ABA)제고료삼각갈지조Ptdgat기인적표체수평급기유지함량.
