CAJ | 학술논문

目的确定1例大疱性类天疱疮并获得性血友病A患者的临床和实验室诊断;通过体内外干预实验观察获得性血友病A患者体内的FⅧ抑制物对正常人血浆及兔FⅧ凝血活性(FⅧ:C)的影响;确定患者FⅧ抑制物的IgG亚型和结构表位,以揭示该病发病的分子机制.方法用Ⅰ期法测定患者血浆FⅧ:C;以Bethesda单位(BU)表示FⅧ:C抑制物滴度;用蛋白A-琼脂糖柱纯化患者及正常人血浆IgG;用活化部分凝血活酶时间(APTT)分析其对FⅧ:C的抑制作用;观察FⅧ抑制物对兔血浆FⅧ:C活性的抑制作用;分别用抗IgG1、IgG2、IgG3、IgG4抗体作Western blot,结合灰度扫描确定患者血浆IgG亚型相对表达量;散射比浊法测定患者及正常人体内各IgG亚型浓度;用FⅧ/FⅧ抑制物固相结合试验及Western blot鉴定患者IgG抗体(FⅧ抑制物)作用于FⅧ的具体"表位".结果 ①患者APTT明显延长,正常血浆不能纠正;FⅧ:C＜1.5%,FⅧ抑制物滴度为147.8 BU;②纯化的患者IgG以剂量依赖方式抑制正常人混合血浆FⅧ:C;动物实验显示患者血浆能以时间依赖方式延长兔血浆APTT;③Western blot结果显示FⅧ抑制物成分主要为IgG4,其次为IgG1,FⅧ抑制物作用于FⅧ:C的结构相对分子质量为44×103.散射比浊法测定结果显示患者体内IgG4、IgG1含量明显高于正常人.结论研究结果证明大疱性类天疱疮并获得性血友病A患者体内FⅧ抑制物对FⅧ:C有抑制作用,FⅧ抑制物的IgG亚型主要为IgG4,其次为IgG1;患者FⅧ抑制物作用于FⅧ的表位为相对分子质量为44×103的肽段,揭示了该获得性血友病A发生、发展的分子机制.
목적 학정1례대포성류천포창병획득성혈우병A환자적림상화실험실진단;통과체내외간예실험관찰획득성혈우병A환자체내적FⅧ억제물대정상인혈장급토FⅧ응혈활성(FⅧ:C)적영향;학정환자FⅧ억제물적IgG아형화결구표위,이게시해병발병적분자궤제.방법 용Ⅰ기법측정환자혈장FⅧ:C;이Bethesda단위(BU)표시FⅧ:C억제물적도;용단백A-경지당주순화환자급정상인혈장IgG;용활화부분응혈활매시간(APTT)분석기대FⅧ:C적억제작용;관찰FⅧ억제물대토혈장FⅧ:C활성적억제작용;분별용항IgG1、IgG2、IgG3、IgG4항체작Western blot,결합회도소묘학정환자혈장IgG아형상대표체량;산사비탁법측정환자급정상인체내각IgG아형농도;용FⅧ/FⅧ억제물고상결합시험급Western blot감정환자IgG항체(FⅧ억제물)작용우FⅧ적구체"표위".결과 ①환자APTT명현연장,정상혈장불능규정;FⅧ:C＜1.5%,FⅧ억제물적도위147.8 BU;②순화적환자IgG이제량의뢰방식억제정상인혼합혈장FⅧ:C;동물실험현시환자혈장능이시간의뢰방식연장토혈장APTT;③Western blot결과현시FⅧ억제물성분주요위IgG4,기차위IgG1,FⅧ억제물작용우FⅧ:C적결구상대분자질량위44×103.산사비탁법측정결과현시환자체내IgG4、IgG1함량명현고우정상인.결론 연구결과증명대포성류천포창병획득성혈우병A환자체내FⅧ억제물대FⅧ:C유억제작용,FⅧ억제물적IgG아형주요위IgG4,기차위IgG1;환자FⅧ억제물작용우FⅧ적표위위상대분자질량위44×103적태단,게시료해획득성혈우병A발생、발전적분자궤제.