CAJ | 학술논문

目的研究人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit,hTERT)基因启动子调控单纯疱疹胸苷激酶/更昔洛韦(herpes simplex virus-thymidine kinase/ganciclovir, Hsv-tk/GCV)治疗系统对人肺癌细胞株A549的选择体外杀伤作用.方法 (1)用脂质体法将hTERT启动子和sv40启动子调控的tk基因表达质粒(pGL3-hTp-tk和pGL3-sv40-tk)转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞株A549及端粒酶阴性的人胚肺成纤维细胞株MRC-5,用逆转录-PCR方法检测转染细胞中tk基因的表达情况; (2)用MTT法检测GCV对上述转染细胞体外增殖的抑制作用; (3) 用流式细胞仪检测GCV对上述转染细胞凋亡和细胞周期的影响. 结果 (1)转染pGL3-sv40-tk的细胞A549、MRC-5和转染pGL3-hTp-tk的A549均有tk mRNA表达,转染pGL3-hTp-tk的MRC-5无tk mRNA表达; (2)GCV对转染pGL3-sv40-tk的细胞A549、MRC-5和转染pGL3-hTp-tk的A549体外增殖均有明显抑制作用,对转染pGL3-hTp-tk的MRC-5无明显抑制作用; (3) 转染pGL3-sv40-tk的A549、MRC-5和转染pGL3-hTp-tk的A549细胞,GCV处理后细胞凋亡指数(21.58%、9.35%和23.19%)均显著高于转染pGL3-hTp的A549和MRC-5细胞(0.78%和0.55%)及空白对照A549和MRC-5细胞(2.17%和0.60%),转染pGL3-hTp-tk的MRC-5细胞凋亡指数(0.88%)无明显升高.结论 hTERT启动子调控Hsv-tk基因可以在肺癌细胞中选择性表达,hTERT调控的Hsv-tk/GCV治疗系统对肺癌细胞体外增殖具有靶向性抑制作用.
목적 연구인단립매최화아단위(human telomerase catalytic subunit,hTERT)기인계동자조공단순포진흉감격매/경석락위(herpes simplex virus-thymidine kinase/ganciclovir, Hsv-tk/GCV)치료계통대인폐암세포주A549적선택체외살상작용.방법 (1)용지질체법장hTERT계동자화sv40계동자조공적tk기인표체질립(pGL3-hTp-tk화pGL3-sv40-tk)전염단립매양성적인폐선암세포주A549급단립매음성적인배폐성섬유세포주MRC-5,용역전록-PCR방법검측전염세포중tk기인적표체정황; (2)용MTT법검측GCV대상술전염세포체외증식적억제작용; (3) 용류식세포의검측GCV대상술전염세포조망화세포주기적영향. 결과 (1)전염pGL3-sv40-tk적세포A549、MRC-5화전염pGL3-hTp-tk적A549균유tk mRNA표체,전염pGL3-hTp-tk적MRC-5무tk mRNA표체; (2)GCV대전염pGL3-sv40-tk적세포A549、MRC-5화전염pGL3-hTp-tk적A549체외증식균유명현억제작용,대전염pGL3-hTp-tk적MRC-5무명현억제작용; (3) 전염pGL3-sv40-tk적A549、MRC-5화전염pGL3-hTp-tk적A549세포,GCV처리후세포조망지수(21.58%、9.35%화23.19%)균현저고우전염pGL3-hTp적A549화MRC-5세포(0.78%화0.55%)급공백대조A549화MRC-5세포(2.17%화0.60%),전염pGL3-hTp-tk적MRC-5세포조망지수(0.88%)무명현승고.결론 hTERT계동자조공Hsv-tk기인가이재폐암세포중선택성표체,hTERT조공적Hsv-tk/GCV치료계통대폐암세포체외증식구유파향성억제작용.