第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2004年
1期
55-57
,共3页
何颖%黄力%章亚男%黎怀星%陈蕊雯%孙树汉
何穎%黃力%章亞男%黎懷星%陳蕊雯%孫樹漢
하영%황력%장아남%려부성%진예문%손수한
阿尔茨海默病%表位%IgG重链区%重组真核表达载体
阿爾茨海默病%錶位%IgG重鏈區%重組真覈錶達載體
아이자해묵병%표위%IgG중련구%중조진핵표체재체
目的:将淀粉样蛋白N端的抗原表位基因以4种不同的组合与小鼠IgG重链区基因融合,构建抗阿尔茨海默病的重组质粒.方法:通过RT-PCR技术从小鼠脾组织中克隆IgG重链区cDNA,将柔性接头与抗原表位基因序列设计在5′端引物中,然后以克隆出的小鼠IgG重链区cDNA为模板,用PCR法克隆出由柔性接头将抗原表位和IgG重链区基因融合在一起的序列,并插入到pVAX质粒载体中.结果:扩增出来的4种不同组合的抗原表位基因和IgG重链区基因融合序列大小分别为999、1 020、1 005、1 026 bp,均与GenBank上登录的相符;pVAX重组质粒酶切结果表明融合基因正确地插入到pVAX载体中,全自动测序亦显示抗原表位基因和IgG重链区基因为所需基因,接头序列也完全正确.结论:成功构建了抗阿尔茨海默病的4种表位基因-IgG重链区融合表达的重组质粒,为探索防治阿尔茨海默病打下基础.
目的:將澱粉樣蛋白N耑的抗原錶位基因以4種不同的組閤與小鼠IgG重鏈區基因融閤,構建抗阿爾茨海默病的重組質粒.方法:通過RT-PCR技術從小鼠脾組織中剋隆IgG重鏈區cDNA,將柔性接頭與抗原錶位基因序列設計在5′耑引物中,然後以剋隆齣的小鼠IgG重鏈區cDNA為模闆,用PCR法剋隆齣由柔性接頭將抗原錶位和IgG重鏈區基因融閤在一起的序列,併插入到pVAX質粒載體中.結果:擴增齣來的4種不同組閤的抗原錶位基因和IgG重鏈區基因融閤序列大小分彆為999、1 020、1 005、1 026 bp,均與GenBank上登錄的相符;pVAX重組質粒酶切結果錶明融閤基因正確地插入到pVAX載體中,全自動測序亦顯示抗原錶位基因和IgG重鏈區基因為所需基因,接頭序列也完全正確.結論:成功構建瞭抗阿爾茨海默病的4種錶位基因-IgG重鏈區融閤錶達的重組質粒,為探索防治阿爾茨海默病打下基礎.
목적:장정분양단백N단적항원표위기인이4충불동적조합여소서IgG중련구기인융합,구건항아이자해묵병적중조질립.방법:통과RT-PCR기술종소서비조직중극륭IgG중련구cDNA,장유성접두여항원표위기인서렬설계재5′단인물중,연후이극륭출적소서IgG중련구cDNA위모판,용PCR법극륭출유유성접두장항원표위화IgG중련구기인융합재일기적서렬,병삽입도pVAX질립재체중.결과:확증출래적4충불동조합적항원표위기인화IgG중련구기인융합서렬대소분별위999、1 020、1 005、1 026 bp,균여GenBank상등록적상부;pVAX중조질립매절결과표명융합기인정학지삽입도pVAX재체중,전자동측서역현시항원표위기인화IgG중련구기인위소수기인,접두서렬야완전정학.결론:성공구건료항아이자해묵병적4충표위기인-IgG중련구융합표체적중조질립,위탐색방치아이자해묵병타하기출.
