病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2006年
4期
275-281
,共7页
李弘剑%黎景光%苏运贞%陈浩军%李月琴%叶飞舟%张欣%周天鸿
李弘劍%黎景光%囌運貞%陳浩軍%李月琴%葉飛舟%張訢%週天鴻
리홍검%려경광%소운정%진호군%리월금%협비주%장흔%주천홍
人巨细胞病毒HCMV%ul54基因%RNase P%引导序列(GSs)%荧光定量PCR
人巨細胞病毒HCMV%ul54基因%RNase P%引導序列(GSs)%熒光定量PCR
인거세포병독HCMV%ul54기인%RNase P%인도서렬(GSs)%형광정량PCR
引导序列(Guide Sequences,GSs)是与mRNA靶序列互补并引导RNase P切割的小RNA片段.设计与人巨细胞病毒HCMV(Human Cytomegalovirus,HCMV)ul54基因D片段mRNA序列互补的GS,将其共价结合到大肠杆菌来源RNase P催化核心M1 RNA,构建成T7-M1GS核酶.通过对ul54基因D片段转录产物体外切割实验和将T7-M1GS构建在含有U6启动子的逆转录病毒载体,与构建在真核载体pEGFP-N1的ul54基因D片段共转染人宫颈癌细胞系HeLa的体内切割实验,证实该核酶具备对ul54基因D片段mRNA的特异切割能力,为利用核酶治疗HCMV感染提供实验基础.
引導序列(Guide Sequences,GSs)是與mRNA靶序列互補併引導RNase P切割的小RNA片段.設計與人巨細胞病毒HCMV(Human Cytomegalovirus,HCMV)ul54基因D片段mRNA序列互補的GS,將其共價結閤到大腸桿菌來源RNase P催化覈心M1 RNA,構建成T7-M1GS覈酶.通過對ul54基因D片段轉錄產物體外切割實驗和將T7-M1GS構建在含有U6啟動子的逆轉錄病毒載體,與構建在真覈載體pEGFP-N1的ul54基因D片段共轉染人宮頸癌細胞繫HeLa的體內切割實驗,證實該覈酶具備對ul54基因D片段mRNA的特異切割能力,為利用覈酶治療HCMV感染提供實驗基礎.
인도서렬(Guide Sequences,GSs)시여mRNA파서렬호보병인도RNase P절할적소RNA편단.설계여인거세포병독HCMV(Human Cytomegalovirus,HCMV)ul54기인D편단mRNA서렬호보적GS,장기공개결합도대장간균래원RNase P최화핵심M1 RNA,구건성T7-M1GS핵매.통과대ul54기인D편단전록산물체외절할실험화장T7-M1GS구건재함유U6계동자적역전록병독재체,여구건재진핵재체pEGFP-N1적ul54기인D편단공전염인궁경암세포계HeLa적체내절할실험,증실해핵매구비대ul54기인D편단mRNA적특이절할능력,위이용핵매치료HCMV감염제공실험기출.
