生殖与避孕
生殖與避孕
생식여피잉
REPRODUCTION AND CONTRACEPTION
2006年
5期
265-270
,共6页
石建莉%王晻%程国艳%胡燕琴%刘春萌%徐晨
石建莉%王晻%程國豔%鬍燕琴%劉春萌%徐晨
석건리%왕엄%정국염%호연금%류춘맹%서신
溶脲脲原体%UreG%免疫不育%多克隆抗体%受精
溶脲脲原體%UreG%免疫不育%多剋隆抗體%受精
용뇨뇨원체%UreG%면역불육%다극륭항체%수정
目的:探索与人精子膜存在交叉反应的溶脲脲原体蛋白UreG抗体对小鼠体外受精的影响.方法:提取溶脲脲原体总DNA,用自行设计的引物扩增UreG全序列,PCR产物经TA克隆后,用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切,克隆到表达载体pET-28a(+)中.在E.coliBL 21中,异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达His融合蛋白.用亲和层析纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,获取多克隆抗体.观察该抗体对小鼠体外受精的影响.结果:对表达重组蛋白的质粒进行DNA测序以及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,证实获取了目的蛋白.ELISA检测证实,免疫小鼠产生了高效价的抗体.该抗体能够抑制小鼠精卵的融合.结论:与人精子膜存在交叉反应的溶脲脲原体蛋白UreG抗体,可导致小鼠精卵结合率降低.
目的:探索與人精子膜存在交扠反應的溶脲脲原體蛋白UreG抗體對小鼠體外受精的影響.方法:提取溶脲脲原體總DNA,用自行設計的引物擴增UreG全序列,PCR產物經TA剋隆後,用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ雙酶切,剋隆到錶達載體pET-28a(+)中.在E.coliBL 21中,異丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導下錶達His融閤蛋白.用親和層析純化的重組蛋白免疫BALB/c小鼠,穫取多剋隆抗體.觀察該抗體對小鼠體外受精的影響.結果:對錶達重組蛋白的質粒進行DNA測序以及十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分析,證實穫取瞭目的蛋白.ELISA檢測證實,免疫小鼠產生瞭高效價的抗體.該抗體能夠抑製小鼠精卵的融閤.結論:與人精子膜存在交扠反應的溶脲脲原體蛋白UreG抗體,可導緻小鼠精卵結閤率降低.
목적:탐색여인정자막존재교차반응적용뇨뇨원체단백UreG항체대소서체외수정적영향.방법:제취용뇨뇨원체총DNA,용자행설계적인물확증UreG전서렬,PCR산물경TA극륭후,용BamH Ⅰ화Hind Ⅲ쌍매절,극륭도표체재체pET-28a(+)중.재E.coliBL 21중,이병기-β-류대반유당감(IPTG)유도하표체His융합단백.용친화층석순화적중조단백면역BALB/c소서,획취다극륭항체.관찰해항체대소서체외수정적영향.결과:대표체중조단백적질립진행DNA측서이급십이완기류산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)분석,증실획취료목적단백.ELISA검측증실,면역소서산생료고효개적항체.해항체능구억제소서정란적융합.결론:여인정자막존재교차반응적용뇨뇨원체단백UreG항체,가도치소서정란결합솔강저.
