经济林研究
經濟林研究
경제림연구
ECONOMIC FOREST RESEARCHES
2010年
1期
35-40
,共6页
冯富娟%赵丹%孙晓艳%韩士杰%许小妍
馮富娟%趙丹%孫曉豔%韓士傑%許小妍
풍부연%조단%손효염%한사걸%허소연
红松%SSR%优化%正交设计%单因子试验
紅鬆%SSR%優化%正交設計%單因子試驗
홍송%SSR%우화%정교설계%단인자시험
为了建立红松SSR-PCR最佳反应体系,以CTAB法提取的红松针叶DNA为模板,应用单因子试验及L16(45)正交试验系统分析了DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶浓度等对SSR-PCR扩增结果的影响,并对延伸时间、热循环参数进行了探讨,建立了稳定的、可重复的红松SSR-PCR最佳反应体系及PCR扩增参数.结果表明,PCR的最佳反应体系为:10 μL体系中,1×PCR buffer 1 μL、DNA模板50～120 ng,Mg2+3 mmol/L,dNTP 0.4 mmol/L,引物0.5 μmol/L,Taq酶0.75 U.利用该体系筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物13对.在此反应体系下,所扩增谱带清晰、稳定、多态性高.
為瞭建立紅鬆SSR-PCR最佳反應體繫,以CTAB法提取的紅鬆針葉DNA為模闆,應用單因子試驗及L16(45)正交試驗繫統分析瞭DNA模闆濃度、Mg2+濃度、dNTPs濃度、引物濃度、Taq酶濃度等對SSR-PCR擴增結果的影響,併對延伸時間、熱循環參數進行瞭探討,建立瞭穩定的、可重複的紅鬆SSR-PCR最佳反應體繫及PCR擴增參數.結果錶明,PCR的最佳反應體繫為:10 μL體繫中,1×PCR buffer 1 μL、DNA模闆50～120 ng,Mg2+3 mmol/L,dNTP 0.4 mmol/L,引物0.5 μmol/L,Taq酶0.75 U.利用該體繫篩選齣擴增條帶清晰、多態性豐富的SSR引物13對.在此反應體繫下,所擴增譜帶清晰、穩定、多態性高.
위료건립홍송SSR-PCR최가반응체계,이CTAB법제취적홍송침협DNA위모판,응용단인자시험급L16(45)정교시험계통분석료DNA모판농도、Mg2+농도、dNTPs농도、인물농도、Taq매농도등대SSR-PCR확증결과적영향,병대연신시간、열순배삼수진행료탐토,건립료은정적、가중복적홍송SSR-PCR최가반응체계급PCR확증삼수.결과표명,PCR적최가반응체계위:10 μL체계중,1×PCR buffer 1 μL、DNA모판50～120 ng,Mg2+3 mmol/L,dNTP 0.4 mmol/L,인물0.5 μmol/L,Taq매0.75 U.이용해체계사선출확증조대청석、다태성봉부적SSR인물13대.재차반응체계하,소확증보대청석、은정、다태성고.
