中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
2期
260-267
,共8页
尹青松%谭获%杨力建%陈少华%查显丰%叶静梅%李扬秋
尹青鬆%譚穫%楊力建%陳少華%查顯豐%葉靜梅%李颺鞦
윤청송%담획%양력건%진소화%사현봉%협정매%리양추
弥漫大B细胞淋巴瘤%TCR转基因%细胞毒活性
瀰漫大B細胞淋巴瘤%TCR轉基因%細胞毒活性
미만대B세포림파류%TCR전기인%세포독활성
目的:分析弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)抗原特异T细胞受体(TCR)Vα23-Vβ13基因修饰T细胞后的体外特异性杀伤活性.方法:扩增并克隆已鉴定的DLBCL患者外周血中单克隆增殖T细胞的TCR Vβ13和TCR Vα23基因全长序列,构建TCR Vβ13-IRES-TCR-Vα23双基因重组质粒,经核转染的方法将其转染正常人T细胞,通过real-time PCR和Western blotting检测TCR Vβ13和TCR Vα23这2个外源基因在mRNA和蛋白水平的体外表达情况,并对TCR转基因T细胞进行体外细胞毒性检测.结果:经酶切分析和核酸序列测定证实重组质粒构建正确,转染正常人T细胞后,TCR Vβ13和TCR Vα23在mRNA及蛋白水平实现了共表达.转染后3 d,TCR转基因T细胞对DLBCL细胞株Toledo细胞的杀伤活性明显高于非特异细胞株Raji细胞和Molt-4细胞,显示出特异性细胞毒活性.结论:成功构建DLBCL相关抗原特异的TCR Vβ13-IRES-TCR Vα23双基因真核表达质粒;TCR基因修饰T细胞可获得特异性细胞毒活性.
目的:分析瀰漫大B細胞淋巴瘤(DLBCL)抗原特異T細胞受體(TCR)Vα23-Vβ13基因脩飾T細胞後的體外特異性殺傷活性.方法:擴增併剋隆已鑒定的DLBCL患者外週血中單剋隆增殖T細胞的TCR Vβ13和TCR Vα23基因全長序列,構建TCR Vβ13-IRES-TCR-Vα23雙基因重組質粒,經覈轉染的方法將其轉染正常人T細胞,通過real-time PCR和Western blotting檢測TCR Vβ13和TCR Vα23這2箇外源基因在mRNA和蛋白水平的體外錶達情況,併對TCR轉基因T細胞進行體外細胞毒性檢測.結果:經酶切分析和覈痠序列測定證實重組質粒構建正確,轉染正常人T細胞後,TCR Vβ13和TCR Vα23在mRNA及蛋白水平實現瞭共錶達.轉染後3 d,TCR轉基因T細胞對DLBCL細胞株Toledo細胞的殺傷活性明顯高于非特異細胞株Raji細胞和Molt-4細胞,顯示齣特異性細胞毒活性.結論:成功構建DLBCL相關抗原特異的TCR Vβ13-IRES-TCR Vα23雙基因真覈錶達質粒;TCR基因脩飾T細胞可穫得特異性細胞毒活性.
목적:분석미만대B세포림파류(DLBCL)항원특이T세포수체(TCR)Vα23-Vβ13기인수식T세포후적체외특이성살상활성.방법:확증병극륭이감정적DLBCL환자외주혈중단극륭증식T세포적TCR Vβ13화TCR Vα23기인전장서렬,구건TCR Vβ13-IRES-TCR-Vα23쌍기인중조질립,경핵전염적방법장기전염정상인T세포,통과real-time PCR화Western blotting검측TCR Vβ13화TCR Vα23저2개외원기인재mRNA화단백수평적체외표체정황,병대TCR전기인T세포진행체외세포독성검측.결과:경매절분석화핵산서렬측정증실중조질립구건정학,전염정상인T세포후,TCR Vβ13화TCR Vα23재mRNA급단백수평실현료공표체.전염후3 d,TCR전기인T세포대DLBCL세포주Toledo세포적살상활성명현고우비특이세포주Raji세포화Molt-4세포,현시출특이성세포독활성.결론:성공구건DLBCL상관항원특이적TCR Vβ13-IRES-TCR Vα23쌍기인진핵표체질립;TCR기인수식T세포가획득특이성세포독활성.
