CAJ | 학술논문

为建立一串红相关序列扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)标记,对引物、dNTP、模板DNA、Taq酶用量及退火温度等因素进行了优化,并用建立的SRAP标记对17个一串红品种进行了鉴定.通过测试,确定了适宜一串红的SRAP-PCR反应体系,反应总体积25 μL,包含PCR缓冲液(含2.0 mmol·L-1 MgCl2),模板DNA 60 ng,dNTP 0.2 mmol·L-1,引物0.4 μmol·L-1,Taq酶1 U.温度梯度试验结果表明,SRAP-PCR对第二阶段的退火温度变化(44～56℃)不敏感.在优化SRAP-PCR体系的基础上,采用44对引物组合对17个一串红品种进行了分析.共筛选到37个多态性引物组合.这些引物组合的多态性信息含量(PIC)为0.215～0.941,平均为0.672;所揭示的基因型数为2～17个,平均为6.76个.仅用F1/R1这一个引物组合就可以鉴别参试的17个品种,包括形态上非常相近的品种‘神州红'和‘帝王',表明SRAP对一串红品种具有较强的鉴别能力.
위건립일천홍상관서렬확증다태성(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)표기,대인물、dNTP、모판DNA、Taq매용량급퇴화온도등인소진행료우화,병용건립적SRAP표기대17개일천홍품충진행료감정.통과측시,학정료괄의일천홍적SRAP-PCR반응체계,반응총체적25 μL,포함PCR완충액(함2.0 mmol·L-1 MgCl2),모판DNA 60 ng,dNTP 0.2 mmol·L-1,인물0.4 μmol·L-1,Taq매1 U.온도제도시험결과표명,SRAP-PCR대제이계단적퇴화온도변화(44～56℃)불민감.재우화SRAP-PCR체계적기출상,채용44대인물조합대17개일천홍품충진행료분석.공사선도37개다태성인물조합.저사인물조합적다태성신식함량(PIC)위0.215～0.941,평균위0.672;소게시적기인형수위2～17개,평균위6.76개.부용F1/R1저일개인물조합취가이감별삼시적17개품충,포괄형태상비상상근적품충‘신주홍'화‘제왕',표명SRAP대일천홍품충구유교강적감별능력.