华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2004年
5期
519-521,534
,共4页
孙义敏%尹丙姣%李卓娅%姜小丹%徐勇
孫義敏%尹丙姣%李卓婭%薑小丹%徐勇
손의민%윤병교%리탁아%강소단%서용
肿瘤坏死因子-α%绿色荧光蛋白%GFP-TNF融合蛋白
腫瘤壞死因子-α%綠色熒光蛋白%GFP-TNF融閤蛋白
종류배사인자-α%록색형광단백%GFP-TNF융합단백
目的为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及其受体(TNFR)的科学研究提供实验工具.方法用基因克隆技术构建了人TNF-α(rhTNF-α)及绿色荧光蛋白(GFP)与人TNF-α的融合蛋白(GFP-TNF)的原核表达质粒pET28a/rhTNF及pET28a/GFP-TNF,分别转化大肠杆菌BL21;用IPTG诱导重组蛋白的表达,超声裂菌,包涵体中的rhTNF-α和GFP-TNF用镍金属螯合层析柱进行纯化;用MTT法检测rhTNF-α和GFP-TNF的生物活性.结果重组表达的rhTNF-α及GFP-TNF均具有明显的细胞毒效应,GFP-TNF还具有GFP的绿色荧光特性.结论rhT-NF-α和GFP-TNF具有生物活性,可用于TNF-α和TNFR的实验研究.
目的為腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及其受體(TNFR)的科學研究提供實驗工具.方法用基因剋隆技術構建瞭人TNF-α(rhTNF-α)及綠色熒光蛋白(GFP)與人TNF-α的融閤蛋白(GFP-TNF)的原覈錶達質粒pET28a/rhTNF及pET28a/GFP-TNF,分彆轉化大腸桿菌BL21;用IPTG誘導重組蛋白的錶達,超聲裂菌,包涵體中的rhTNF-α和GFP-TNF用鎳金屬螯閤層析柱進行純化;用MTT法檢測rhTNF-α和GFP-TNF的生物活性.結果重組錶達的rhTNF-α及GFP-TNF均具有明顯的細胞毒效應,GFP-TNF還具有GFP的綠色熒光特性.結論rhT-NF-α和GFP-TNF具有生物活性,可用于TNF-α和TNFR的實驗研究.
목적위종류배사인자-α(TNF-α)급기수체(TNFR)적과학연구제공실험공구.방법용기인극륭기술구건료인TNF-α(rhTNF-α)급록색형광단백(GFP)여인TNF-α적융합단백(GFP-TNF)적원핵표체질립pET28a/rhTNF급pET28a/GFP-TNF,분별전화대장간균BL21;용IPTG유도중조단백적표체,초성렬균,포함체중적rhTNF-α화GFP-TNF용얼금속오합층석주진행순화;용MTT법검측rhTNF-α화GFP-TNF적생물활성.결과중조표체적rhTNF-α급GFP-TNF균구유명현적세포독효응,GFP-TNF환구유GFP적록색형광특성.결론rhT-NF-α화GFP-TNF구유생물활성,가용우TNF-α화TNFR적실험연구.
