CAJ | 학술논문

目的:近年来,树突状细胞参与调节作用的研究较多.实验拟验证重组腺相关病毒(rAAV)介导癌胚抗原基因转染树突状细胞后其的免疫调节作用的变化.方法:实验于2006-06/2006-11在美国阿肯色大学医学院基因治疗中心完成.①实验方法:取健康人外周血(自愿捐献),采用改良Ficoll密度梯度离心的方法分离外周血单个核细胞,取贴壁细胞,分为rAAV/CEA转染组和空白对照组,均采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素4、肿瘤坏死因子-α诱导树突状细胞前体细胞成熟,将成熟树突状细胞与末梢血淋巴细胞按比例混合培养,可得到激活的细胞毒性T淋巴细胞.②实验评估:采用流式细胞仪检测树突状细胞表面标志表达,细胞毒性T淋巴细胞的免疫表型变化,细胞毒性T淋巴细胞γ-干扰素表达.采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测树突状细胞的白细胞介素12和白细胞介素10表达.结果:①rAAV/CEA转染树突状细胞的CD14较空白对照组降低,共刺激分子CD40、CD80、CD83、CD86表达均较空白对照组高.②成熟树突状细胞细胞因子表达中,rAAV/CEA转染组的白细胞介素12较空白对照组升高,白细胞介素10降低.③与空白对照组比较,rAAV/CEA转染组能高表达CD8+T细胞和其表型CD69,CD8/CD56的T细胞比例上调,CD25+CD4+的T细胞减少.④rAAV/CEA转染的细胞毒性T淋巴细胞表达相对较高水平的γ-干扰素,与杀伤实验结果相吻合.结论:rAAV/CEA转染树突状细胞能够激活细胞毒性T淋巴细胞的特异性杀伤作用,与树突状细胞和细胞毒性T淋巴细胞等免疫细胞表面标志变化和细胞内细胞因子水平变化相关.
목적:근년래,수돌상세포삼여조절작용적연구교다.실험의험증중조선상관병독(rAAV)개도암배항원기인전염수돌상세포후기적면역조절작용적변화.방법:실험우2006-06/2006-11재미국아긍색대학의학원기인치료중심완성.①실험방법:취건강인외주혈(자원연헌),채용개량Ficoll밀도제도리심적방법분리외주혈단개핵세포,취첩벽세포,분위rAAV/CEA전염조화공백대조조,균채용중조인립세포거서세포집락자격인자、백세포개소4、종류배사인자-α유도수돌상세포전체세포성숙,장성숙수돌상세포여말소혈림파세포안비례혼합배양,가득도격활적세포독성T림파세포.②실험평고:채용류식세포의검측수돌상세포표면표지표체,세포독성T림파세포적면역표형변화,세포독성T림파세포γ-간우소표체.채용매련면역흡부법(ELISA법)검측수돌상세포적백세포개소12화백세포개소10표체.결과:①rAAV/CEA전염수돌상세포적CD14교공백대조조강저,공자격분자CD40、CD80、CD83、CD86표체균교공백대조조고.②성숙수돌상세포세포인자표체중,rAAV/CEA전염조적백세포개소12교공백대조조승고,백세포개소10강저.③여공백대조조비교,rAAV/CEA전염조능고표체CD8+T세포화기표형CD69,CD8/CD56적T세포비례상조,CD25+CD4+적T세포감소.④rAAV/CEA전염적세포독성T림파세포표체상대교고수평적γ-간우소,여살상실험결과상문합.결론:rAAV/CEA전염수돌상세포능구격활세포독성T림파세포적특이성살상작용,여수돌상세포화세포독성T림파세포등면역세포표면표지변화화세포내세포인자수평변화상관.