南京大学学报(自然科学版)
南京大學學報(自然科學版)
남경대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NANJING UNIVERSITY
2002年
2期
166-172
,共7页
唐晶%朱洁%智强%焦瑞清%韩俊海%秦浚川
唐晶%硃潔%智彊%焦瑞清%韓俊海%秦浚川
당정%주길%지강%초서청%한준해%진준천
人干细胞因子(hSCF)%共价二聚体%昆虫表达体系
人榦細胞因子(hSCF)%共價二聚體%昆蟲錶達體繫
인간세포인자(hSCF)%공개이취체%곤충표체체계
应用DNA重组技术构建两端为人干细胞因子(hSCF)1～165肽编码区,中间为柔性连接肽(GGGGSGGGGSGG)编码区的头尾相连的二连体基因(dSCF),并将其插入杆状病毒转移载体pVL1392中.重组转移载体pVL1392-dSCF与野生型苜蓿夜蛾核型多角体病毒AcNPvDNA共转染草地贪夜蛾细胞Sf9,经胞内同源重组和4轮筛选获得纯净的重组病毒AcNPV-dSCF.重组病毒感染Sf9单层培养细胞时,主要以分泌形式表达二连体蛋白,经MTT比色法测得dSCF的表达量约为1 180 units/3×106 cells.Western Blotting鉴定了昆虫细胞表达的重组人二连体干细胞因子(rhdSCF),两种主要产物的分子量分别为40 kDa、49 kDa.
應用DNA重組技術構建兩耑為人榦細胞因子(hSCF)1～165肽編碼區,中間為柔性連接肽(GGGGSGGGGSGG)編碼區的頭尾相連的二連體基因(dSCF),併將其插入桿狀病毒轉移載體pVL1392中.重組轉移載體pVL1392-dSCF與野生型苜蓿夜蛾覈型多角體病毒AcNPvDNA共轉染草地貪夜蛾細胞Sf9,經胞內同源重組和4輪篩選穫得純淨的重組病毒AcNPV-dSCF.重組病毒感染Sf9單層培養細胞時,主要以分泌形式錶達二連體蛋白,經MTT比色法測得dSCF的錶達量約為1 180 units/3×106 cells.Western Blotting鑒定瞭昆蟲細胞錶達的重組人二連體榦細胞因子(rhdSCF),兩種主要產物的分子量分彆為40 kDa、49 kDa.
응용DNA중조기술구건량단위인간세포인자(hSCF)1～165태편마구,중간위유성련접태(GGGGSGGGGSGG)편마구적두미상련적이련체기인(dSCF),병장기삽입간상병독전이재체pVL1392중.중조전이재체pVL1392-dSCF여야생형목숙야아핵형다각체병독AcNPvDNA공전염초지탐야아세포Sf9,경포내동원중조화4륜사선획득순정적중조병독AcNPV-dSCF.중조병독감염Sf9단층배양세포시,주요이분비형식표체이련체단백,경MTT비색법측득dSCF적표체량약위1 180 units/3×106 cells.Western Blotting감정료곤충세포표체적중조인이련체간세포인자(rhdSCF),량충주요산물적분자량분별위40 kDa、49 kDa.
