中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2008年
11期
984-987,992
,共5页
张霞%彭艳%俞丽丽%陈建鹤%王怡波%林建波%倪健%殷明
張霞%彭豔%俞麗麗%陳建鶴%王怡波%林建波%倪健%慇明
장하%팽염%유려려%진건학%왕이파%림건파%예건%은명
F1-F0 ATP合成酶beta亚基%单克隆抗体%多柔比星%肿瘤耐药
F1-F0 ATP閤成酶beta亞基%單剋隆抗體%多柔比星%腫瘤耐藥
F1-F0 ATP합성매beta아기%단극륭항체%다유비성%종류내약
目的:制备鼠抗人F1-F0 ATP合成酶 beta亚基(hATP5B)单抗,并对其特异性和抗肿瘤活性进行研究.方法:以原核表达人hATP5B免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术,筛选分泌抗hATP5B单抗的杂交瘤细胞株.采用 Protein A亲和层析法纯化抗体腹水,SDS-PAGE检测纯化产物纯度.利用Western blot、细胞免疫荧光对其特异性进行鉴定,并通过抑制乳腺癌细胞MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr表面ATP生成,细胞毒性实验进行抗肿瘤活性研究.结果:获得一株稳定表达抗hATP5B单抗的杂交瘤细胞株Mab3B8,Western blot和细胞免疫荧光结果表明,该抗体与乳腺癌MCF-7及其耐药细胞MCF-7/Adr细胞天然抗原结合;可明显抑制MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞膜表面ATP合成;与化疗药物多柔比星(曾用名:阿霉素)联合作用,可降低化疗药物多柔比星对肿瘤细胞的IC50.结论:成功建立了一株可特异性识别天然hATP5B的单抗,有阻断肿瘤细胞膜表面ATP合成活性并可明显增强MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞对多柔比星敏感性的作用.此项研究对膜表达F1-F0 ATP合成酶功能探讨及肿瘤治疗研究都具有重要意义.
目的:製備鼠抗人F1-F0 ATP閤成酶 beta亞基(hATP5B)單抗,併對其特異性和抗腫瘤活性進行研究.方法:以原覈錶達人hATP5B免疫BALB/c小鼠,通過雜交瘤技術,篩選分泌抗hATP5B單抗的雜交瘤細胞株.採用 Protein A親和層析法純化抗體腹水,SDS-PAGE檢測純化產物純度.利用Western blot、細胞免疫熒光對其特異性進行鑒定,併通過抑製乳腺癌細胞MCF-7及其耐藥株MCF-7/Adr錶麵ATP生成,細胞毒性實驗進行抗腫瘤活性研究.結果:穫得一株穩定錶達抗hATP5B單抗的雜交瘤細胞株Mab3B8,Western blot和細胞免疫熒光結果錶明,該抗體與乳腺癌MCF-7及其耐藥細胞MCF-7/Adr細胞天然抗原結閤;可明顯抑製MCF-7及其耐藥株MCF-7/Adr細胞膜錶麵ATP閤成;與化療藥物多柔比星(曾用名:阿黴素)聯閤作用,可降低化療藥物多柔比星對腫瘤細胞的IC50.結論:成功建立瞭一株可特異性識彆天然hATP5B的單抗,有阻斷腫瘤細胞膜錶麵ATP閤成活性併可明顯增彊MCF-7及其耐藥株MCF-7/Adr細胞對多柔比星敏感性的作用.此項研究對膜錶達F1-F0 ATP閤成酶功能探討及腫瘤治療研究都具有重要意義.
목적:제비서항인F1-F0 ATP합성매 beta아기(hATP5B)단항,병대기특이성화항종류활성진행연구.방법:이원핵표체인hATP5B면역BALB/c소서,통과잡교류기술,사선분비항hATP5B단항적잡교류세포주.채용 Protein A친화층석법순화항체복수,SDS-PAGE검측순화산물순도.이용Western blot、세포면역형광대기특이성진행감정,병통과억제유선암세포MCF-7급기내약주MCF-7/Adr표면ATP생성,세포독성실험진행항종류활성연구.결과:획득일주은정표체항hATP5B단항적잡교류세포주Mab3B8,Western blot화세포면역형광결과표명,해항체여유선암MCF-7급기내약세포MCF-7/Adr세포천연항원결합;가명현억제MCF-7급기내약주MCF-7/Adr세포막표면ATP합성;여화료약물다유비성(증용명:아매소)연합작용,가강저화료약물다유비성대종류세포적IC50.결론:성공건립료일주가특이성식별천연hATP5B적단항,유조단종류세포막표면ATP합성활성병가명현증강MCF-7급기내약주MCF-7/Adr세포대다유비성민감성적작용.차항연구대막표체F1-F0 ATP합성매공능탐토급종류치료연구도구유중요의의.
