中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2009年
5期
321-325,封2,插1
,共7页
张立凤%桂永浩%王跃祥%蒋璆%宋后燕
張立鳳%桂永浩%王躍祥%蔣璆%宋後燕
장립봉%계영호%왕약상%장구%송후연
Thx1%斑马鱼%骨形式蛋白2b%Tbx20%Tbx2
Thx1%斑馬魚%骨形式蛋白2b%Tbx20%Tbx2
Thx1%반마어%골형식단백2b%Tbx20%Tbx2
目的 采用吗啡啉修饰反义寡核苷酸显微注射方法下调斑马鱼Tbx1基因表达,研究斑马鱼Tbx1基因功能下调对其他两个T盒基因Tbx20和Tbx2表达的影响.方法 采用吗啡啉修饰的反义寡核苷酸显微注射方法抑制斑马鱼Tbx1基因表达,分别将2.5、5、8、10ng吗啡啉反义寡核苷酸在斑马鱼0-4细胞期注入胚胎,并构建Tbx20,骨形成蛋白2b(Bmp2b)和Tbx2反义RNA探针,进行整体原位杂交,观察Tbx1基因下调对Tbx20、Bmp2b及Tbx2表达的影响.结果 Tbx1吗啡啉寡核苷酸显微注射组胚胎表现出鳃弓、耳囊、心血管系统和胸腺的发育异常.Tbx1基因下调导致Tbx20的表达出现改变,Tbx20在心脏的表达与对照组相比明显下调,神经元的表达范围明显缩小;Tbx1基因功能下调会导致Bmp2b在心脏和咽囊的表达减低,Bmp2b在后部咽囊的表达较前部咽囊减低得更为明显;Tbx1基因功能下调胚胎,Tbx2在鳃弓的表达模式发生改变,48 hpf,Tbx2在鳃弓的表达出现从后向前逐渐减低,鳃弓的表达范围较对照组明显缩小.结论 Tbx1在发育过程中,会对其他T盒基因,如Tbx20和Tbx2具有激活或抑制的调控作用.Tbx1对Tbx20的作用可能是通过影响Bmp2b的途径,继发地影响Tbx20的表达.Tbx1基因功能下调,会改变Tbx2在鳃弓的表达模式.
目的 採用嗎啡啉脩飾反義寡覈苷痠顯微註射方法下調斑馬魚Tbx1基因錶達,研究斑馬魚Tbx1基因功能下調對其他兩箇T盒基因Tbx20和Tbx2錶達的影響.方法 採用嗎啡啉脩飾的反義寡覈苷痠顯微註射方法抑製斑馬魚Tbx1基因錶達,分彆將2.5、5、8、10ng嗎啡啉反義寡覈苷痠在斑馬魚0-4細胞期註入胚胎,併構建Tbx20,骨形成蛋白2b(Bmp2b)和Tbx2反義RNA探針,進行整體原位雜交,觀察Tbx1基因下調對Tbx20、Bmp2b及Tbx2錶達的影響.結果 Tbx1嗎啡啉寡覈苷痠顯微註射組胚胎錶現齣鰓弓、耳囊、心血管繫統和胸腺的髮育異常.Tbx1基因下調導緻Tbx20的錶達齣現改變,Tbx20在心髒的錶達與對照組相比明顯下調,神經元的錶達範圍明顯縮小;Tbx1基因功能下調會導緻Bmp2b在心髒和嚥囊的錶達減低,Bmp2b在後部嚥囊的錶達較前部嚥囊減低得更為明顯;Tbx1基因功能下調胚胎,Tbx2在鰓弓的錶達模式髮生改變,48 hpf,Tbx2在鰓弓的錶達齣現從後嚮前逐漸減低,鰓弓的錶達範圍較對照組明顯縮小.結論 Tbx1在髮育過程中,會對其他T盒基因,如Tbx20和Tbx2具有激活或抑製的調控作用.Tbx1對Tbx20的作用可能是通過影響Bmp2b的途徑,繼髮地影響Tbx20的錶達.Tbx1基因功能下調,會改變Tbx2在鰓弓的錶達模式.
목적 채용마배람수식반의과핵감산현미주사방법하조반마어Tbx1기인표체,연구반마어Tbx1기인공능하조대기타량개T합기인Tbx20화Tbx2표체적영향.방법 채용마배람수식적반의과핵감산현미주사방법억제반마어Tbx1기인표체,분별장2.5、5、8、10ng마배람반의과핵감산재반마어0-4세포기주입배태,병구건Tbx20,골형성단백2b(Bmp2b)화Tbx2반의RNA탐침,진행정체원위잡교,관찰Tbx1기인하조대Tbx20、Bmp2b급Tbx2표체적영향.결과 Tbx1마배람과핵감산현미주사조배태표현출새궁、이낭、심혈관계통화흉선적발육이상.Tbx1기인하조도치Tbx20적표체출현개변,Tbx20재심장적표체여대조조상비명현하조,신경원적표체범위명현축소;Tbx1기인공능하조회도치Bmp2b재심장화인낭적표체감저,Bmp2b재후부인낭적표체교전부인낭감저득경위명현;Tbx1기인공능하조배태,Tbx2재새궁적표체모식발생개변,48 hpf,Tbx2재새궁적표체출현종후향전축점감저,새궁적표체범위교대조조명현축소.결론 Tbx1재발육과정중,회대기타T합기인,여Tbx20화Tbx2구유격활혹억제적조공작용.Tbx1대Tbx20적작용가능시통과영향Bmp2b적도경,계발지영향Tbx20적표체.Tbx1기인공능하조,회개변Tbx2재새궁적표체모식.