中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
49期
9138-9141
,共4页
王莹%赵洪昌%赵文静%叶冬霞%李晶%罗速
王瑩%趙洪昌%趙文靜%葉鼕霞%李晶%囉速
왕형%조홍창%조문정%협동하%리정%라속
神经细胞%骨髓间充质干细胞%分离培养%诱导分化%β-巯基乙醇%二甲基亚砜
神經細胞%骨髓間充質榦細胞%分離培養%誘導分化%β-巰基乙醇%二甲基亞砜
신경세포%골수간충질간세포%분리배양%유도분화%β-구기을순%이갑기아풍
背景:文献报道体外诱导骨髓间充质细胞定向分化为神经元样细胞多应用神经生长因子类多肽制剂,选择纯化学诱导剂尚不多见.目的:建立人骨髓间充质干细胞分离培养体系,体外定向诱导人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞.方法:密度梯度离心、贴壁培养法和消化时间控制相结合分离纯化人骨髓间充质干细胞并鉴定,采用B一巯基乙醇和二甲基亚砜诱导分化为神经元样细胞,观察细胞形态,通过尼氏染色、NSE和NF-200免疫细胞化学染色对已分化的神经元样细胞进行鉴定和分化率分析.结果与结论:分离得到的骨髓间充质干细胞为成纤维样细胞,可见多个核仁,β-巯基乙醇和二甲基亚砜诱导后,间充质干细胞分化为神经元样细胞,伸出较长轴突样和树突样突起且有分支,诱导后的神经元样细胞胞质中存在着深蓝色颗粒状的尼氏小体,NSE、NF-200免疫荧光细胞化学染色均呈阳性,阳性率分别为(85.6±6.7)%和(73.2±5.6)%.结果证实采用密度梯度离心、贴壁培养法和消化时间控制相结合能够成功分离和培养人骨髓间充质干细胞,人骨髓间充质干细胞能够在诱导剂β-巯基乙醇和二甲基亚砜的诱导下体外诱导分化为神经元样细胞.
揹景:文獻報道體外誘導骨髓間充質細胞定嚮分化為神經元樣細胞多應用神經生長因子類多肽製劑,選擇純化學誘導劑尚不多見.目的:建立人骨髓間充質榦細胞分離培養體繫,體外定嚮誘導人骨髓間充質榦細胞分化為神經元樣細胞.方法:密度梯度離心、貼壁培養法和消化時間控製相結閤分離純化人骨髓間充質榦細胞併鑒定,採用B一巰基乙醇和二甲基亞砜誘導分化為神經元樣細胞,觀察細胞形態,通過尼氏染色、NSE和NF-200免疫細胞化學染色對已分化的神經元樣細胞進行鑒定和分化率分析.結果與結論:分離得到的骨髓間充質榦細胞為成纖維樣細胞,可見多箇覈仁,β-巰基乙醇和二甲基亞砜誘導後,間充質榦細胞分化為神經元樣細胞,伸齣較長軸突樣和樹突樣突起且有分支,誘導後的神經元樣細胞胞質中存在著深藍色顆粒狀的尼氏小體,NSE、NF-200免疫熒光細胞化學染色均呈暘性,暘性率分彆為(85.6±6.7)%和(73.2±5.6)%.結果證實採用密度梯度離心、貼壁培養法和消化時間控製相結閤能夠成功分離和培養人骨髓間充質榦細胞,人骨髓間充質榦細胞能夠在誘導劑β-巰基乙醇和二甲基亞砜的誘導下體外誘導分化為神經元樣細胞.
배경:문헌보도체외유도골수간충질세포정향분화위신경원양세포다응용신경생장인자류다태제제,선택순화학유도제상불다견.목적:건립인골수간충질간세포분리배양체계,체외정향유도인골수간충질간세포분화위신경원양세포.방법:밀도제도리심、첩벽배양법화소화시간공제상결합분리순화인골수간충질간세포병감정,채용B일구기을순화이갑기아풍유도분화위신경원양세포,관찰세포형태,통과니씨염색、NSE화NF-200면역세포화학염색대이분화적신경원양세포진행감정화분화솔분석.결과여결론:분리득도적골수간충질간세포위성섬유양세포,가견다개핵인,β-구기을순화이갑기아풍유도후,간충질간세포분화위신경원양세포,신출교장축돌양화수돌양돌기차유분지,유도후적신경원양세포포질중존재착심람색과립상적니씨소체,NSE、NF-200면역형광세포화학염색균정양성,양성솔분별위(85.6±6.7)%화(73.2±5.6)%.결과증실채용밀도제도리심、첩벽배양법화소화시간공제상결합능구성공분리화배양인골수간충질간세포,인골수간충질간세포능구재유도제β-구기을순화이갑기아풍적유도하체외유도분화위신경원양세포.