广东畜牧兽医科技
廣東畜牧獸醫科技
엄동축목수의과기
GUANDONG JOURNAL OF ANIMAL AND VETERINARY SCIENCE
2002年
4期
32-35
,共4页
唐冬生%田允波%顾万军%施家琦
唐鼕生%田允波%顧萬軍%施傢琦
당동생%전윤파%고만군%시가기
多位点%基因打靶%体细胞%多拷贝序列
多位點%基因打靶%體細胞%多拷貝序列
다위점%기인타파%체세포%다고패서렬
利用多拷贝序列作为靶位点进行多住点基因打靶技术的研究。通过显微切割、茵落杂交、Southern杂交等方法获得人类D、G组染色体短臂多拷贝序列(DGMS),然后利用DGMS构建含Neo/TK基因正负选择系统的基因打靶我体。采用电穿孔、CA18和GCV筛选进行Neo基因的基因打靶,并经PCR、FISH定位、Neo基因表达等证实Neo基因定点整合到D、G组染色体短臂且表达,最终建立了一种有效的、多个安全位点的基因打靶技术。该技术可应用于体外细胞和动植物的转基因,甚至人类的基因治疗。
利用多拷貝序列作為靶位點進行多住點基因打靶技術的研究。通過顯微切割、茵落雜交、Southern雜交等方法穫得人類D、G組染色體短臂多拷貝序列(DGMS),然後利用DGMS構建含Neo/TK基因正負選擇繫統的基因打靶我體。採用電穿孔、CA18和GCV篩選進行Neo基因的基因打靶,併經PCR、FISH定位、Neo基因錶達等證實Neo基因定點整閤到D、G組染色體短臂且錶達,最終建立瞭一種有效的、多箇安全位點的基因打靶技術。該技術可應用于體外細胞和動植物的轉基因,甚至人類的基因治療。
이용다고패서렬작위파위점진행다주점기인타파기술적연구。통과현미절할、인락잡교、Southern잡교등방법획득인류D、G조염색체단비다고패서렬(DGMS),연후이용DGMS구건함Neo/TK기인정부선택계통적기인타파아체。채용전천공、CA18화GCV사선진행Neo기인적기인타파,병경PCR、FISH정위、Neo기인표체등증실Neo기인정점정합도D、G조염색체단비차표체,최종건립료일충유효적、다개안전위점적기인타파기술。해기술가응용우체외세포화동식물적전기인,심지인류적기인치료。