细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2006年
6期
786-789,793
,共5页
王晋%罗文新%李利峰%陈瑛炜%王明桥%张军%夏宁邵
王晉%囉文新%李利峰%陳瑛煒%王明橋%張軍%夏寧邵
왕진%라문신%리리봉%진영위%왕명교%장군%하저소
人源天然噬菌体抗体库%单链抗体%多样性
人源天然噬菌體抗體庫%單鏈抗體%多樣性
인원천연서균체항체고%단련항체%다양성
目的: 构建多样性良好的人源天然噬菌体抗体库.方法: 从正常人外周血中分离淋巴细胞, 以RT-PCR和半巢式PCR扩增重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因, 以重叠延伸PCR将VH、 VL组装成scFv基因, 并将其克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中.以pCANTAB-5E电转化大肠杆菌TG1, 构建人源天然噬菌体抗体库, 测序分析抗体基因的家族信息和多样性, 并用多种抗原对其进行筛选.结果: 获得了库容为2×108的人源天然噬菌体抗体库.分别用5种抗原对其进行筛选, 均可获得特异性噬菌体抗体的富集.结论: 成功地构建了一个多样性良好的人源天然噬菌体抗体库, 可用于制备具有应用前景的人源抗体.
目的: 構建多樣性良好的人源天然噬菌體抗體庫.方法: 從正常人外週血中分離淋巴細胞, 以RT-PCR和半巢式PCR擴增重鏈可變區VH基因和輕鏈可變區VL基因, 以重疊延伸PCR將VH、 VL組裝成scFv基因, 併將其剋隆入噬菌粒載體pCANTAB-5E中.以pCANTAB-5E電轉化大腸桿菌TG1, 構建人源天然噬菌體抗體庫, 測序分析抗體基因的傢族信息和多樣性, 併用多種抗原對其進行篩選.結果: 穫得瞭庫容為2×108的人源天然噬菌體抗體庫.分彆用5種抗原對其進行篩選, 均可穫得特異性噬菌體抗體的富集.結論: 成功地構建瞭一箇多樣性良好的人源天然噬菌體抗體庫, 可用于製備具有應用前景的人源抗體.
목적: 구건다양성량호적인원천연서균체항체고.방법: 종정상인외주혈중분리림파세포, 이RT-PCR화반소식PCR확증중련가변구VH기인화경련가변구VL기인, 이중첩연신PCR장VH、 VL조장성scFv기인, 병장기극륭입서균립재체pCANTAB-5E중.이pCANTAB-5E전전화대장간균TG1, 구건인원천연서균체항체고, 측서분석항체기인적가족신식화다양성, 병용다충항원대기진행사선.결과: 획득료고용위2×108적인원천연서균체항체고.분별용5충항원대기진행사선, 균가획득특이성서균체항체적부집.결론: 성공지구건료일개다양성량호적인원천연서균체항체고, 가용우제비구유응용전경적인원항체.
