CAJ | 학술논문

目的优化研究芯片显色法检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药基因的最佳条件.方法自制DNA芯片,每条寡核苷酸探针片段长度为19 bp,点样浓度在15 μmol/L,以痰液为待检标本,分别用不同引物、Mg2+、核苷酸、DNA聚合酶浓度等进行多重聚合酶链反应;分别在不同时间、温度下进行杂交,分别在不同酶作用时间和显色时间进行分析,比较不同条件芯片检测结果.结果引物、Mg2+、核苷酸、DNA聚合酶浓度分别为0.2 μmol/L、1 mmol/L、0.2 mmol/L、5 U效果最好,杂交时间和杂交温度分别为0.5 h、60 ℃信号最强,酶作用时间和显色时间均为0.5 h时得到最佳结果.结论在最佳条件下,该技术的重复性、特异性、灵敏度与可靠性均较好,适合基层医院推广应用.
목적 우화연구심편현색법검측결핵분지간균리복평화이연정내약기인적최가조건.방법 자제DNA심편,매조과핵감산탐침편단장도위19 bp,점양농도재15 μmol/L,이담액위대검표본,분별용불동인물、Mg2+、핵감산、DNA취합매농도등진행다중취합매련반응;분별재불동시간、온도하진행잡교,분별재불동매작용시간화현색시간진행분석,비교불동조건심편검측결과.결과 인물、Mg2+、핵감산、DNA취합매농도분별위0.2 μmol/L、1 mmol/L、0.2 mmol/L、5 U효과최호,잡교시간화잡교온도분별위0.5 h、60 ℃신호최강,매작용시간화현색시간균위0.5 h시득도최가결과.결론 재최가조건하,해기술적중복성、특이성、령민도여가고성균교호,괄합기층의원추엄응용.