生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
1期
158-164
,共7页
L-苏氨酸%蛋氨酸%赖氨酸%基因敲除%谷氨酸棒杆菌
L-囌氨痠%蛋氨痠%賴氨痠%基因敲除%穀氨痠棒桿菌
L-소안산%단안산%뢰안산%기인고제%곡안산봉간균
谷氨酸棒杆菌中metX基因编码蛋氨酸合成途径关键酶高丝氨酸乙酰转移酶,dapA基因编码赖氨酸合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合成酶.为研究这两个基因缺失对苏氨酸积累的影响,以谷氨酸棒杆菌R102(AHVτ)为出发菌株,通过重叠延伸PCR及同源重组技术分别构建了metX、dapA单基因缺失突变株R102ΔmetX、R102ΔdapA以及双基因缺失的突变株R102ΔmetXΔdapA.对出发菌以及上述3株重组菌进行初步摇瓶发酵试验,用HPLC法测定发酵液中苏氨酸含量.结果表明,发酵72 h后,3株重组菌的苏氨酸产量分别为2.58、2.38和3.01 g/L,比原始菌株分别提高了42.5%、31.5%和66.3%.
穀氨痠棒桿菌中metX基因編碼蛋氨痠閤成途徑關鍵酶高絲氨痠乙酰轉移酶,dapA基因編碼賴氨痠閤成途徑關鍵酶二氫吡啶二羧痠閤成酶.為研究這兩箇基因缺失對囌氨痠積纍的影響,以穀氨痠棒桿菌R102(AHVτ)為齣髮菌株,通過重疊延伸PCR及同源重組技術分彆構建瞭metX、dapA單基因缺失突變株R102ΔmetX、R102ΔdapA以及雙基因缺失的突變株R102ΔmetXΔdapA.對齣髮菌以及上述3株重組菌進行初步搖瓶髮酵試驗,用HPLC法測定髮酵液中囌氨痠含量.結果錶明,髮酵72 h後,3株重組菌的囌氨痠產量分彆為2.58、2.38和3.01 g/L,比原始菌株分彆提高瞭42.5%、31.5%和66.3%.
곡안산봉간균중metX기인편마단안산합성도경관건매고사안산을선전이매,dapA기인편마뢰안산합성도경관건매이경필정이최산합성매.위연구저량개기인결실대소안산적루적영향,이곡안산봉간균R102(AHVτ)위출발균주,통과중첩연신PCR급동원중조기술분별구건료metX、dapA단기인결실돌변주R102ΔmetX、R102ΔdapA이급쌍기인결실적돌변주R102ΔmetXΔdapA.대출발균이급상술3주중조균진행초보요병발효시험,용HPLC법측정발효액중소안산함량.결과표명,발효72 h후,3주중조균적소안산산량분별위2.58、2.38화3.01 g/L,비원시균주분별제고료42.5%、31.5%화66.3%.
