中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2011年
2期
156-161,后插4
,共7页
裘佳%马晓骊%王欣%陈虹%黄秉仁
裘佳%馬曉驪%王訢%陳虹%黃秉仁
구가%마효려%왕흔%진홍%황병인
胰岛素样生长因子结合蛋白-3%甲状腺激素受体α1%三碘甲状腺原氨酸%生长激素启动子
胰島素樣生長因子結閤蛋白-3%甲狀腺激素受體α1%三碘甲狀腺原氨痠%生長激素啟動子
이도소양생장인자결합단백-3%갑상선격소수체α1%삼전갑상선원안산%생장격소계동자
目的 探讨胰岛索样生长因子结合蛋白 -3(IGFBP-3)与甲状腺激素受体α1(TRα1)之间的相互作用,及其对甲状腺激素应答性基因转录作用的调节.方法 采用谷胱甘肽-S-转移酶拉下实验、免疫共沉淀以及荧光共振能量转移实验检测IGFBP-3与TRα1之间的相互作用;激光共聚焦显微镜观察两种蛋白在细胞中的分布;采用双萤光素酶实验检测过表达IGFBP-3对甲状腺素T3激活的生长激素启动子的影响.结果 谷胱甘肽-S-转移酶拉下实验、免疫共沉淀以及荧光共振能量转移实验结果证明IGFBP-3 与TRα1在体内和体外都可以相互作用,激光共聚焦显微镜观察IGFBP-3和TRα1可以共定位于HEK-293细胞的细胞核.通过双萤光素酶实验检测到过表达IGFBP-3可以抑制甲状腺激素对生长激素启动子的激活作用(P<0.01).结论 IGFBP-3通过与 TRα1 相互作用抑制甲状腺激素应答性基因的转录,为IG-FBP-3 在核内发挥胰岛素样生长因子非依赖的作用提供了新的实验依据.
目的 探討胰島索樣生長因子結閤蛋白 -3(IGFBP-3)與甲狀腺激素受體α1(TRα1)之間的相互作用,及其對甲狀腺激素應答性基因轉錄作用的調節.方法 採用穀胱甘肽-S-轉移酶拉下實驗、免疫共沉澱以及熒光共振能量轉移實驗檢測IGFBP-3與TRα1之間的相互作用;激光共聚焦顯微鏡觀察兩種蛋白在細胞中的分佈;採用雙螢光素酶實驗檢測過錶達IGFBP-3對甲狀腺素T3激活的生長激素啟動子的影響.結果 穀胱甘肽-S-轉移酶拉下實驗、免疫共沉澱以及熒光共振能量轉移實驗結果證明IGFBP-3 與TRα1在體內和體外都可以相互作用,激光共聚焦顯微鏡觀察IGFBP-3和TRα1可以共定位于HEK-293細胞的細胞覈.通過雙螢光素酶實驗檢測到過錶達IGFBP-3可以抑製甲狀腺激素對生長激素啟動子的激活作用(P<0.01).結論 IGFBP-3通過與 TRα1 相互作用抑製甲狀腺激素應答性基因的轉錄,為IG-FBP-3 在覈內髮揮胰島素樣生長因子非依賴的作用提供瞭新的實驗依據.
목적 탐토이도색양생장인자결합단백 -3(IGFBP-3)여갑상선격소수체α1(TRα1)지간적상호작용,급기대갑상선격소응답성기인전록작용적조절.방법 채용곡광감태-S-전이매랍하실험、면역공침정이급형광공진능량전이실험검측IGFBP-3여TRα1지간적상호작용;격광공취초현미경관찰량충단백재세포중적분포;채용쌍형광소매실험검측과표체IGFBP-3대갑상선소T3격활적생장격소계동자적영향.결과 곡광감태-S-전이매랍하실험、면역공침정이급형광공진능량전이실험결과증명IGFBP-3 여TRα1재체내화체외도가이상호작용,격광공취초현미경관찰IGFBP-3화TRα1가이공정위우HEK-293세포적세포핵.통과쌍형광소매실험검측도과표체IGFBP-3가이억제갑상선격소대생장격소계동자적격활작용(P<0.01).결론 IGFBP-3통과여 TRα1 상호작용억제갑상선격소응답성기인적전록,위IG-FBP-3 재핵내발휘이도소양생장인자비의뢰적작용제공료신적실험의거.
