CAJ | 학술논문

尤文肉瘤EWS-FLI1融合蛋白B淋巴细胞表位的预测及鉴定
우문육류EWS-FLI1융합단백B림파세포표위적예측급감정
Prediction and identification of B-lymphocyte epitopes derived from Ewing's sarcoma EWS-FLI1 fusion protein

万方数据

中国免疫学杂志中國免疫學雜誌 중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2011年 12期 1070-1074 ,共5页

黄路%罗嘉全%刘会文%张战民%廖翔%邓高荣%曹凯%安洪%舒勇%韩智敏

황로%라가전%류회문%장전민%료상%산고영%조개%안홍%서용%한지민

尤文肉瘤%EWS-FLI1蛋白%融合蛋白%嵌合蛋白%B淋巴细胞表位尤文肉瘤%EWS-FLI1蛋白%融閤蛋白%嵌閤蛋白%B淋巴細胞錶位
우문육류%EWS-FLI1단백%융합단백%감합단백%B림파세포표위

目的:预测及鉴定尤文肉瘤EWS-FLI1融合蛋白的B淋巴细胞表位.方法:采用综合法预测EWS-FLI1蛋白的二级结构及B淋巴细胞表位,运用标准Fmoc方案合成预测的表位肽,HPLC和MS进行表位肽的纯度分析及分子量鉴定,ELISA法检测表位肽的抗原性,并测定表位肽特异性免疫血清效价,Western blot鉴定免疫血清与EWS-FLI1蛋白亲合力.结果:通过综合法预测得到3个高分值的B淋巴细胞表位,HPLC分析合成的表位肽纯度>85%,MS鉴定表位肽的分子量无误,ELISA法检测证实3个B淋巴细胞表位肽均可获得强的抗原抗体反应,其中表位肽P2的抗原性最强,在1∶40时A450=2.46,达到最高,1∶10 240稀释后抗原抗体反应仍呈阳性;用这3个B淋巴细胞表位肽免疫新西兰兔也能获得理想的抗体效价,其中表位肽P2获得的抗体效价最高,1∶512 000稀释时A450=1.11;Western blot鉴定表位肽P1、P2免疫血清能够结合EWS-FLI1蛋白.结论:尤文肉瘤EWS-FLI1蛋白的B淋巴细胞表位肽P1、P2具有潜在的抗原性和免疫原性.
목적:예측급감정우문육류EWS-FLI1융합단백적B림파세포표위.방법:채용종합법예측EWS-FLI1단백적이급결구급B림파세포표위,운용표준Fmoc방안합성예측적표위태,HPLC화MS진행표위태적순도분석급분자량감정,ELISA법검측표위태적항원성,병측정표위태특이성면역혈청효개,Western blot감정면역혈청여EWS-FLI1단백친합력.결과:통과종합법예측득도3개고분치적B림파세포표위,HPLC분석합성적표위태순도>85%,MS감정표위태적분자량무오,ELISA법검측증실3개B림파세포표위태균가획득강적항원항체반응,기중표위태P2적항원성최강,재1∶40시A450=2.46,체도최고,1∶10 240희석후항원항체반응잉정양성;용저3개B림파세포표위태면역신서란토야능획득이상적항체효개,기중표위태P2획득적항체효개최고,1∶512 000희석시A450=1.11;Western blot감정표위태P1、P2면역혈청능구결합EWS-FLI1단백.결론:우문육류EWS-FLI1단백적B림파세포표위태P1、P2구유잠재적항원성화면역원성.