棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2011年
5期
427-432
,共6页
琦明玉%陆才瑞%邹长松%王巧莲%宋国立
琦明玉%陸纔瑞%鄒長鬆%王巧蓮%宋國立
기명옥%륙재서%추장송%왕교련%송국립
Lea蛋白:D113基因启动子%D34基因启动子%启动子分析%表达载体
Lea蛋白:D113基因啟動子%D34基因啟動子%啟動子分析%錶達載體
Lea단백:D113기인계동자%D34기인계동자%계동자분석%표체재체
种子特异性表达启动子是植物种子基因工程改良的重要工具.Lea(Late embryogenesis abundant)蛋白是胚胎发育后期种子中大量积累的一系列蛋白质,因此,其调控序列可能提供一个很好来源的种子特异性表达启动子.为研究植物Lea蛋白基因启动子在种子中的特异性表达,本研究通过PCR扩增,从亚洲棉(Gossypium arboreum L.)石系亚1号中克隆了Lea蛋白基因家族中D113基因上游1262 bp的调控序列和D34基因上游1445 bp的调控序列.DNA序列分析结果表明,克隆到的两个片段与已报道的Lea蛋白基因同一家族该基因的对应序列的相似性分别达到97.43％和94.27％.分别用限制性内切酶HindⅢ和xbaI双酶切重组质粒pGEMT-D和改造后的表达载体pBI121-T,分别回收pGEMT-D重组质粒中的小片段和pBI121-T植物表达载体中的大片段,经连接、转化和鉴定,获得由D113基因启动子和D34基因启动子驱动报告基因GUS的新型植物表达载体pBI121-D113、pBI1 21-D34,为外源基因在棉花种子中的定位表达研究奠定基础.
種子特異性錶達啟動子是植物種子基因工程改良的重要工具.Lea(Late embryogenesis abundant)蛋白是胚胎髮育後期種子中大量積纍的一繫列蛋白質,因此,其調控序列可能提供一箇很好來源的種子特異性錶達啟動子.為研究植物Lea蛋白基因啟動子在種子中的特異性錶達,本研究通過PCR擴增,從亞洲棉(Gossypium arboreum L.)石繫亞1號中剋隆瞭Lea蛋白基因傢族中D113基因上遊1262 bp的調控序列和D34基因上遊1445 bp的調控序列.DNA序列分析結果錶明,剋隆到的兩箇片段與已報道的Lea蛋白基因同一傢族該基因的對應序列的相似性分彆達到97.43％和94.27％.分彆用限製性內切酶HindⅢ和xbaI雙酶切重組質粒pGEMT-D和改造後的錶達載體pBI121-T,分彆迴收pGEMT-D重組質粒中的小片段和pBI121-T植物錶達載體中的大片段,經連接、轉化和鑒定,穫得由D113基因啟動子和D34基因啟動子驅動報告基因GUS的新型植物錶達載體pBI121-D113、pBI1 21-D34,為外源基因在棉花種子中的定位錶達研究奠定基礎.
충자특이성표체계동자시식물충자기인공정개량적중요공구.Lea(Late embryogenesis abundant)단백시배태발육후기충자중대량적루적일계렬단백질,인차,기조공서렬가능제공일개흔호래원적충자특이성표체계동자.위연구식물Lea단백기인계동자재충자중적특이성표체,본연구통과PCR확증,종아주면(Gossypium arboreum L.)석계아1호중극륭료Lea단백기인가족중D113기인상유1262 bp적조공서렬화D34기인상유1445 bp적조공서렬.DNA서렬분석결과표명,극륭도적량개편단여이보도적Lea단백기인동일가족해기인적대응서렬적상사성분별체도97.43％화94.27％.분별용한제성내절매HindⅢ화xbaI쌍매절중조질립pGEMT-D화개조후적표체재체pBI121-T,분별회수pGEMT-D중조질립중적소편단화pBI121-T식물표체재체중적대편단,경련접、전화화감정,획득유D113기인계동자화D34기인계동자구동보고기인GUS적신형식물표체재체pBI121-D113、pBI1 21-D34,위외원기인재면화충자중적정위표체연구전정기출.
