眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2009年
4期
265-268
,共4页
金玲%陈剑%周清%吴静%徐锦堂%赵松滨
金玲%陳劍%週清%吳靜%徐錦堂%趙鬆濱
금령%진검%주청%오정%서금당%조송빈
羊膜上皮细胞%角膜上皮细胞%细胞培养%气-液界面培养法
羊膜上皮細胞%角膜上皮細胞%細胞培養%氣-液界麵培養法
양막상피세포%각막상피세포%세포배양%기-액계면배양법
目的 应用培养的兔羊膜上皮细胞(AECs)体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料,探讨利用AECs重建角膜表层的可行性.方法 取妊娠晚期新西兰大白兔(27～28孕周)的羊膜,制成AECs单细胞悬液,用含血清和表皮生长因子(EGF)的DMEM/F12培养液培养、传代,利用免疫组织化学单克隆抗体AE1/AE3、AE5检测培养的AECs中细胞角蛋白ck3/12的表达;将体外培养的2～3代兔AECs种植在新鲜兔角膜基质上,利用气-液界面培养法使之复层化,体外构建复层上皮细胞-角膜基质移植材料,进行光学显微镜和扫描电镜观察,并进行免疫组织化学测定.结果 体外培养的兔AECs呈现单克隆抗体AE1/AE3、AE5表达阳性,AECs在新鲜兔角膜基质上能形成形态类似于正常角膜上皮细胞的3～5层复层结构,且复层化后的上皮细胞单克隆抗体AE5表达阳性.结论 应用培养的AECs能成功构建类似角膜表层的复层上皮细胞-角膜基质移植材料,AECs可能成为重建角膜表层的一种新的细胞来源.
目的 應用培養的兔羊膜上皮細胞(AECs)體外構建複層上皮細胞-角膜基質移植材料,探討利用AECs重建角膜錶層的可行性.方法 取妊娠晚期新西蘭大白兔(27～28孕週)的羊膜,製成AECs單細胞懸液,用含血清和錶皮生長因子(EGF)的DMEM/F12培養液培養、傳代,利用免疫組織化學單剋隆抗體AE1/AE3、AE5檢測培養的AECs中細胞角蛋白ck3/12的錶達;將體外培養的2～3代兔AECs種植在新鮮兔角膜基質上,利用氣-液界麵培養法使之複層化,體外構建複層上皮細胞-角膜基質移植材料,進行光學顯微鏡和掃描電鏡觀察,併進行免疫組織化學測定.結果 體外培養的兔AECs呈現單剋隆抗體AE1/AE3、AE5錶達暘性,AECs在新鮮兔角膜基質上能形成形態類似于正常角膜上皮細胞的3～5層複層結構,且複層化後的上皮細胞單剋隆抗體AE5錶達暘性.結論 應用培養的AECs能成功構建類似角膜錶層的複層上皮細胞-角膜基質移植材料,AECs可能成為重建角膜錶層的一種新的細胞來源.
목적 응용배양적토양막상피세포(AECs)체외구건복층상피세포-각막기질이식재료,탐토이용AECs중건각막표층적가행성.방법 취임신만기신서란대백토(27～28잉주)적양막,제성AECs단세포현액,용함혈청화표피생장인자(EGF)적DMEM/F12배양액배양、전대,이용면역조직화학단극륭항체AE1/AE3、AE5검측배양적AECs중세포각단백ck3/12적표체;장체외배양적2～3대토AECs충식재신선토각막기질상,이용기-액계면배양법사지복층화,체외구건복층상피세포-각막기질이식재료,진행광학현미경화소묘전경관찰,병진행면역조직화학측정.결과 체외배양적토AECs정현단극륭항체AE1/AE3、AE5표체양성,AECs재신선토각막기질상능형성형태유사우정상각막상피세포적3～5층복층결구,차복층화후적상피세포단극륭항체AE5표체양성.결론 응용배양적AECs능성공구건유사각막표층적복층상피세포-각막기질이식재료,AECs가능성위중건각막표층적일충신적세포래원.
