蚌埠医学院学报
蚌埠醫學院學報
방부의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE BENGBU
2006年
1期
1-4
,共4页
免疫学技术%凝胶电泳迁移率变动分析%增强化学发光%核因子-κB%T细胞
免疫學技術%凝膠電泳遷移率變動分析%增彊化學髮光%覈因子-κB%T細胞
면역학기술%응효전영천이솔변동분석%증강화학발광%핵인자-κB%T세포
目的:建立凝胶电泳迁移率变动分析(EMSA)化学发光法检测T细胞激活后核因子κB (NF-κB)活性的方法.方法:人外周血单个核细胞(PBMC)用抗CD3单克隆抗体(mAB)激活T细胞后,提取细胞核蛋白与生物素标记的NF-κB特异性探针结合,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,转移至正电荷尼龙膜,加链霉亲和素辣根过氧化物酶和化学发光底物后用X光胶片显影,检测NF-κB活性.结果:人PBMC用抗CD3 mAB刺激后15 min,明显可见NF-κB活化,30 min时达高峰,60 min时降低.结论:EMSA化学发光法检测转录因子活性是一种较简捷和高灵敏度的技术,可用于检测T细胞活化后NF-κB活性变化.
目的:建立凝膠電泳遷移率變動分析(EMSA)化學髮光法檢測T細胞激活後覈因子κB (NF-κB)活性的方法.方法:人外週血單箇覈細胞(PBMC)用抗CD3單剋隆抗體(mAB)激活T細胞後,提取細胞覈蛋白與生物素標記的NF-κB特異性探針結閤,通過非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,轉移至正電荷尼龍膜,加鏈黴親和素辣根過氧化物酶和化學髮光底物後用X光膠片顯影,檢測NF-κB活性.結果:人PBMC用抗CD3 mAB刺激後15 min,明顯可見NF-κB活化,30 min時達高峰,60 min時降低.結論:EMSA化學髮光法檢測轉錄因子活性是一種較簡捷和高靈敏度的技術,可用于檢測T細胞活化後NF-κB活性變化.
목적:건립응효전영천이솔변동분석(EMSA)화학발광법검측T세포격활후핵인자κB (NF-κB)활성적방법.방법:인외주혈단개핵세포(PBMC)용항CD3단극륭항체(mAB)격활T세포후,제취세포핵단백여생물소표기적NF-κB특이성탐침결합,통과비변성취병희선알응효전영,전이지정전하니룡막,가련매친화소랄근과양화물매화화학발광저물후용X광효편현영,검측NF-κB활성.결과:인PBMC용항CD3 mAB자격후15 min,명현가견NF-κB활화,30 min시체고봉,60 min시강저.결론:EMSA화학발광법검측전록인자활성시일충교간첩화고령민도적기술,가용우검측T세포활화후NF-κB활성변화.
