CAJ | 학술논문

目的采用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记技术,对外源性骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)迁移至骨折区域进行示踪,为骨修复中干细胞作用机制的研究创造条件.方法 EGFP标记日本大耳白兔MSCs,部分标记细胞经成骨诱导培养后检测其细胞表型.另取日本大耳白兔18只制成双侧尺骨骨折模型,随机分为实验组与对照组,每组9只,分别于术前24 h、术后1和24 h,将扩增的标记MSCs和未标记MSCs以1×107个/kg剂量分别注入实验组和对照组的耳缘静脉;术后48 h处死动物,取左侧尺骨断端组织行冰冻切片、荧光显微镜观察,右侧样本组织固定后行石蜡切片、HE染色、光镜观察.结果 MSCs培养后分化及表型良好,标记MSCs仍具有较快的增殖能力,经成骨诱导培养后,可表达碱性磷酸酶,并具有钙结节形成能力;兔体内实验术后48 h动物均存活,HE染色见骨折断端为血肿组织.术前24 h、术后1和24 h静脉注入标记细胞后均可在骨断端组织中观察到EGFP阳性细胞,而对照组则未见EGFP阳性细胞.结论兔MSCs经EGFP标记后仍然具有成骨细胞诱导能力;EGFP示踪技术提示,静脉途径给予标记的MSCs可以迁移聚集到骨折区域的血肿组织内.
목적채용증강형록색형광단백(enhanced green fluorescent protein,EGFP)표기기술,대외원성골수간충질간세포(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)천이지골절구역진행시종,위골수복중간세포작용궤제적연구창조조건.방법 EGFP표기일본대이백토MSCs,부분표기세포경성골유도배양후검측기세포표형.령취일본대이백토18지제성쌍측척골골절모형,수궤분위실험조여대조조,매조9지,분별우술전24 h、술후1화24 h,장확증적표기MSCs화미표기MSCs이1×107개/kg제량분별주입실험조화대조조적이연정맥;술후48 h처사동물,취좌측척골단단조직행빙동절편、형광현미경관찰,우측양본조직고정후행석사절편、HE염색、광경관찰.결과 MSCs배양후분화급표형량호,표기MSCs잉구유교쾌적증식능력,경성골유도배양후,가표체감성린산매,병구유개결절형성능력;토체내실험술후48 h동물균존활,HE염색견골절단단위혈종조직.술전24 h、술후1화24 h정맥주입표기세포후균가재골단단조직중관찰도EGFP양성세포,이대조조칙미견EGFP양성세포.결론토MSCs경EGFP표기후잉연구유성골세포유도능력;EGFP시종기술제시,정맥도경급여표기적MSCs가이천이취집도골절구역적혈종조직내.