现代医药卫生
現代醫藥衛生
현대의약위생
MODERN MEDICINE HEALTH
2011年
3期
321-322
,共2页
大鼠%海马%蛋白质组%蛋白质电泳
大鼠%海馬%蛋白質組%蛋白質電泳
대서%해마%단백질조%단백질전영
目的:对SD(Sprague Dawley)大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量进行筛选,获得优质凝胶图像.方法:本实验为8月龄SD大鼠,注射戊巴比妥钠麻醉后断头取海马组织,称蘑后加入裂解液,经过匀浆、孵育、离心等处理后测定蛋白浓度.拟采用银染法凝胶染色时上样量分别为200 μg、400 μg、600 μg、800 μg;拟采用考马斯亮蓝染法凝胶染色时上样量分别为1 000 μg、1 200μg、1 400μg、1 600μg.采用双向凝胶电泳后,分别采用银染和考染法凝胶染色.染色后凝胶采用Umax PowerLookⅢ扫描仪和photo-shop8.0图像软件进行扫描,采用ETTAN ImageMaster 2D Elite 4.01软件进行图像分析.结果:双向凝胶电泳胶图经扫描分析,蛋白质上样量400μg电泳银染后所获得的胶图蛋白质点区隔明显,背景清晰,经过点识别等处理后获得(756±42)个点;而蛋白质上样量200 μg、600 μg和800 μg电泳银染后获得的胶图蛋白质点较少;蛋白质上样量1 600μg电泳考染后所获得的胶图蛋白质点区隔明显,背景清晰,经过点识别等处理后获得(812±60)个点;而蛋白质上样量1 000 μg、1 200μg和1 400 μg电泳考马斯亮蓝染法后获得的胶图蛋白质点较少.结论:采用银染法SD大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量为400 μg时可以获得良好的凝胶图像;而采用考染法SD大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量为1 600 μg时即可获得良好的凝胶图像.
目的:對SD(Sprague Dawley)大鼠海馬蛋白質組雙嚮凝膠電泳上樣量進行篩選,穫得優質凝膠圖像.方法:本實驗為8月齡SD大鼠,註射戊巴比妥鈉痳醉後斷頭取海馬組織,稱蘑後加入裂解液,經過勻漿、孵育、離心等處理後測定蛋白濃度.擬採用銀染法凝膠染色時上樣量分彆為200 μg、400 μg、600 μg、800 μg;擬採用攷馬斯亮藍染法凝膠染色時上樣量分彆為1 000 μg、1 200μg、1 400μg、1 600μg.採用雙嚮凝膠電泳後,分彆採用銀染和攷染法凝膠染色.染色後凝膠採用Umax PowerLookⅢ掃描儀和photo-shop8.0圖像軟件進行掃描,採用ETTAN ImageMaster 2D Elite 4.01軟件進行圖像分析.結果:雙嚮凝膠電泳膠圖經掃描分析,蛋白質上樣量400μg電泳銀染後所穫得的膠圖蛋白質點區隔明顯,揹景清晰,經過點識彆等處理後穫得(756±42)箇點;而蛋白質上樣量200 μg、600 μg和800 μg電泳銀染後穫得的膠圖蛋白質點較少;蛋白質上樣量1 600μg電泳攷染後所穫得的膠圖蛋白質點區隔明顯,揹景清晰,經過點識彆等處理後穫得(812±60)箇點;而蛋白質上樣量1 000 μg、1 200μg和1 400 μg電泳攷馬斯亮藍染法後穫得的膠圖蛋白質點較少.結論:採用銀染法SD大鼠海馬蛋白質組雙嚮凝膠電泳上樣量為400 μg時可以穫得良好的凝膠圖像;而採用攷染法SD大鼠海馬蛋白質組雙嚮凝膠電泳上樣量為1 600 μg時即可穫得良好的凝膠圖像.
목적:대SD(Sprague Dawley)대서해마단백질조쌍향응효전영상양량진행사선,획득우질응효도상.방법:본실험위8월령SD대서,주사무파비타납마취후단두취해마조직,칭마후가입렬해액,경과균장、부육、리심등처리후측정단백농도.의채용은염법응효염색시상양량분별위200 μg、400 μg、600 μg、800 μg;의채용고마사량람염법응효염색시상양량분별위1 000 μg、1 200μg、1 400μg、1 600μg.채용쌍향응효전영후,분별채용은염화고염법응효염색.염색후응효채용Umax PowerLookⅢ소묘의화photo-shop8.0도상연건진행소묘,채용ETTAN ImageMaster 2D Elite 4.01연건진행도상분석.결과:쌍향응효전영효도경소묘분석,단백질상양량400μg전영은염후소획득적효도단백질점구격명현,배경청석,경과점식별등처리후획득(756±42)개점;이단백질상양량200 μg、600 μg화800 μg전영은염후획득적효도단백질점교소;단백질상양량1 600μg전영고염후소획득적효도단백질점구격명현,배경청석,경과점식별등처리후획득(812±60)개점;이단백질상양량1 000 μg、1 200μg화1 400 μg전영고마사량람염법후획득적효도단백질점교소.결론:채용은염법SD대서해마단백질조쌍향응효전영상양량위400 μg시가이획득량호적응효도상;이채용고염법SD대서해마단백질조쌍향응효전영상양량위1 600 μg시즉가획득량호적응효도상.